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目的：通过观察理气化痰活血方（以下简称W1）及其三个拆方理气方（以下简称LQ）、清热方（以下简称QR）、活血方（以下简称HX）和益气养阴清热方（以下简称W2）及其拆方益气方（以下简称YQ）、养阴方（以下简称YY）、清热方（以下简称QR）对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1增殖抑制和EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKC-α与TSHR—PLC-β3—PI3K—PKCα信号转导通路的影响，研究理气化痰活血和益气养阴清热治疗甲状腺癌的机理，探讨气滞、痰凝、血瘀、热毒、气阴两虚等与甲状腺癌变和EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα与TSHR—PLC-β3—PI3K—PKCα信号转导的关系。方法：采用频数分布分析、主成分分析、聚类分析等数理统计方法进行中医诊治甲状腺瘤和癌的证候和方药分析与规律探讨；以人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1为实验对象，运用倒置显微镜观察细胞生长情况，MTT法测定并计算细胞抑制率，筛选出明显抑制甲状腺癌细胞TPC-1增殖的有效药物；运用正交试验设计优选出疗效最佳方剂组合；分别设对照组、理气化痰活血方及三个拆方、益气养阴清热方及三个拆方处理细胞，在倒置显微镜下观察TPC-1细胞生长状态及形态改变；运用流式细胞术测定理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1周期的影响；运用Western blot法检测各药物组对TPC-1细胞EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα和TSHR—PLC-β3—PI3K—PKCα信号转导通路各蛋白表达的影响。结果：①文献统计分析得中医辨证论治甲状腺瘤和癌涉及证型32个，其中气滞痰凝血瘀、肝郁气滞、气阴两虚、痰湿凝滞、痰热互结、肝郁脾虚为主要证型；病机要素13个，其中实证9个，以气滞、痰凝、血瘀、火热为主，虚证4个，以气虚和阴虚为主；脏腑病位6个，主要为肝、脾、肾、心；得156个症状和体征，症状聚类分析得6个聚类证型，分别为肝气郁滞、脾虚痰凝、痰热互结、气阴两虚、气滞血瘀、肝郁化火；涉及方剂396首，其中成方56首，自拟方340首，成方多用和解剂、补益剂、祛痰剂；中药289味，按功能分为19大类，其中化痰止咳平喘药、清热药、补虚药、活血化瘀药、理气药、平肝息风药使用频率较大，药物归经主要在肝、肺、脾、胃、肾、心等。②理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方均明显抑制TPC-1细胞增殖，对细胞形态作用与正常对照相比明显不同。理气化痰活血方理气组细胞呈长梭形；化痰组细胞皱缩，成梭形或圆形，表面粗糙，胞内充满大量颗粒状或空泡样物质；活血组细胞数目明显减少，细胞明显皱缩变小，透光度减低，形态不规则，细胞间隙加大，贴壁性变差；全方组可见细胞皱缩，形态不规则，细胞表面粗糙，多数细胞呈现空泡样结构，细胞碎片增多（见附图1-15）。益气养阴清热方益气组细胞皱缩变小，呈圆形或梭形，细胞表面粗糙，有较多细胞碎片；养阴组细胞变圆或梭形，部分细胞疏松膨胀，细胞间隙加大，胞内充满大量颗粒状或空泡样物质；清热组细胞明显变圆，疏松膨胀，细胞表面粗糙，边缘呈空泡样结构，胞内充满颗粒状物质；全方组细胞形态呈不规则梭形或圆形，细胞表面粗糙，多数细胞呈现空泡样结构，胞内充满颗粒状物质，有大量细胞碎片（见附图16-30）。③理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方均能抑制TPC-1细胞生长，全方作用最强，随药物浓度、时间的增加，对细胞生长抑制呈现剂量—效应、时间—效应依赖关系。④理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方均对TPC-1细胞周期有明显影响，理气化痰活血方各治法组G1期细胞百分比均降低，其中全方组降低最为显著，G2期细胞百分比均明显增加，其中全方组增加最多。益气养阴清热方各治法组G1期细胞百分比均降低，其中养阴组降低最为显著；S期养阴组细胞百分比升高；G2期各加药组细胞百分比均明显增加，其中养阴组增加最多。结果表明理气化痰活血方和益气养阴清热方均将细胞阻滞于G2期，从而抑制细胞生长。⑤人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1可以检测到EGFR、PLC-γ1、P-tyr、PKCα和TSHR、PLC-β3、PI3K蛋白分子不同程度的过表达。⑥当用IC50药物剂量处理细胞时，理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方均能下调EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα和TSHR—PLC-β3—PI3K—PKC-α信号通路各蛋白表达水平。结论：①理气化痰活血方各治疗组和益气养阴清热方各治疗组均能明显抑制人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1的增殖，且均以全方组效果最好；理气、化痰、活血三法连用，或益气、养阴、清热三法连用均具有协同作用。②理气化痰活血方和益气养阴清热方均将TPC-1细胞阻滞于G2期，从而抑制细胞生长。③甲状腺癌发病与EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα和TSHR—PLC-β3—PI3K—PKC-α信号转导增强密切相关。④理气化痰活血方及其拆方和益气养阴清热方及其拆方通过不同程度抑制TPC-1细胞EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα和TSHR—PLC-β3—PI3K—PKC-α信号转导各蛋白表达水平发挥抑制甲状腺癌细胞增殖的作用。⑤通过药效反证，在甲状腺癌病变中,气滞、痰凝、血瘀、热毒、气阴两虚与EGFR—PLC-γ1—P-tyr—PKCα和TSHR—PLC-β3—PI3K—PKC-α信号表达和转导增强密切相关。