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目的:维吾尔族医学体液病证学(体液论)认为,异常黑胆质证是肿瘤、2型糖尿病、心血管疾病等复杂性疾病的主要维医证型和病理状态。前期工作中,本团队开展不同类型肿瘤患者的异常黑胆质证及其对证方药—异常黑胆质成熟剂治疗研究,通过血浆蛋白质组学研究,发现7种肿瘤异常黑胆质证及其方药作用共性的候选差异表达蛋白质,其特异性和准确度尚待进一步验证。故本课题以乳腺癌患者为研究对象,通过维医辩证分型及血浆和肿瘤组织水平的定量验证,探讨乳腺癌异常黑胆质证与上述候选蛋白质指标表达调控的关系,为揭示“异病同证”、“同证同理”等维医基础理论和临床实践的科学性提供依据。方法:(1)选择60例乳腺癌患者,通过维医辩证分型,分为乳腺癌异常黑胆质证38例,非异常黑胆质证(其它证型)22例,以20例健康女性为正常对照,收集了患者和健康人外周血标本;同时在不考虑维医证型的前提下,收集了乳腺癌组织标本56例和正常对照组织24例;(2)在前期工作基础上,选择vWF(血管性血友病因子)、THBS1(血小板反应蛋白质1)、IGFBP2(胰岛素样生长因子结合蛋白)、ORM1(血清类黏蛋白)、FGA(纤维蛋白原A)和SAA1(血清淀粉样蛋白A-1)等6种肿瘤异常黑胆质证共性的候选差异表达蛋白质指标,对外周血标本进行酶联免疫吸附法(ELISA)分析,明确乳腺癌异常黑胆质证与候选蛋白质含量变化的关系;(3)选择候选蛋白质编码基因,设计mRNA序列特异性引物,采用定量RT-PCR分析方法对乳腺癌和正常对照组织进行mRNA表达水平分析,明确乳腺癌与肿瘤组织内候选蛋白质表达调控的关系;(4)通过ELISA和RT-PCR分析数据的Pearson相关性和ROC曲线分析,明确候选蛋白质表达指标变化的相互关系及特异性、灵敏度和准确度。结果:(1)ELISA分析结果显示,乳腺癌异常黑胆质证与非异常黑胆质证及正常对照相比较,体内SAA1、THBS1、vWF、IGFBP2、ORM1和FGA等6种候选蛋白质的血浆含量显著上升(P<0.05);根据Pearson相关性分析,SAA1与THBS1两者及vWF、ORMI和FGA三者之间血浆含量变化均存在一定的相关性;ROC(Receiver Operating Characteristic,受信者操作特性)曲线分析,发现SAA1、vWF、IGFBP2和FGA等4种蛋白质指标检测的准确度较高,其中SAA1和IGFBP2检测的灵敏度和特异性较高;(2)定量RT-PCR分析结果显示,乳腺癌与正常对照相比较,肿瘤组织内SAA1、THBS1、IGFBP2、vWF和ORM1的转录表达水平显著下降(P<0.05)。Pearson相关性和ROC曲线分析显示,SAA1、vWF和ORM1三者及THBS1两者之间转录表达水平变化有一定的相关性。结论:(1)从本研究成果,可推断乳腺癌异常黑胆质证发生与SAA1、THBS1、IGFBP2、vWF、ORM1和FGA等6种肿瘤异常黑胆质证共性候选血浆蛋白质含量上调存在密切关系,证明蛋白质组学研究数据有一定的准确度和可靠性;(2)随着乳腺癌发生,肿瘤组织内SAA1、THBS1、vWF、IGFBP2和ORM1等5种候选蛋白质的转录表达水平可能下调,与肿瘤异常黑胆质证患者体内血浆含量上升相反,其内在调控机制尚需探讨。