【摘 要】
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粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)是实验室使用最为普遍的模式真菌之一。属于粪壳科脉孢菌属,是一种常见的多细胞丝状真菌。其菌丝多核,透明,附有桔色的分生孢子。研究粗糙脉孢菌
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粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)是实验室使用最为普遍的模式真菌之一。属于粪壳科脉孢菌属,是一种常见的多细胞丝状真菌。其菌丝多核,透明,附有桔色的分生孢子。研究粗糙脉孢菌次生代谢产物的化学成分并作为其基因簇的代谢产物生物合成研究的标准化合物,为揭示丝状真菌基因簇的代谢调控奠定基础。本研究涉及的脉孢菌系dim5基因缺失型菌株。Dim5是组蛋白甲基转移酶,该酶与异染色质的形成密切相关。本实验室前期研究发现粗糙脉孢菌dim5敲除(△dim5)菌株次生代谢产物的种类和积累水平明显增加。因此,本论文选用粗糙脉孢菌的△dim5菌株作为研究材料,旨在阐明其次生代谢产物中的化学物成分,研究内容和主要结果如下:1.将粗糙脉孢菌△dim5突变菌株以大米为培养基大量培养,菌丝体进行乙酸乙酯提取,获得了菌丝体乙酸乙酯提取浸膏,并以薄层层析(TLC)做初步分析,获得多个差异性的活性斑点。2.以TLC为导向,对次生代谢产物进行定性分析。运用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20色谱法、制备薄层色谱法等手段,对获得的乙酸乙酯浸膏中的化合物进行分离纯化,以GC-MS、LC-MS、1H-NMR、13C-NMR、DEPT、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC、单晶衍射等现代波谱技术对结构解析,共鉴定出了11个化合物,分别是:3,6二异丁基-2,5-哌嗪二酮,壬酸,月桂酸,十六-3,5,11,13-四烯酸,亚油酸,对羟基苯乙酸,对羟基苯甲酸,麦角甾醇,formic acid 1-amino-2-(4-hydroxy phenyl)-ethyl este,3-(2,5-dimethoxy phenyl)-2-(2-hydroxy benzoyl)-furo[3,2-c]chromen-4-one,和螺环化合物1-(4-methoxy phenyl)-3a-methyl-4-oxo-3,3a,4,5-tetrahydro cyclopenta[c]N-4-methoxy benzenesulfonamide quinoline-2,2-N,N-dimethyl urea,其中,十六-3,5,11,13-四烯酸和formic acid1-amino-2-(4-hydroxyl phenyl)-ethyl este为新化合物,3-(2,5-dimethoxy phenyl)-2-(2-hydroxy benzoyl)-furo[3,2-c]chromen-4-one是首次从生物体中发现的化合物,且是pks6基因的代谢产物,螺环化合物1-(4-methoxy phenyl)-3a-methyl-4-oxo-3,3a,4,5-tetrahydro cyclopenta[c]N-4-methoxy benzenesulfonamidequinoline-2,2-N,N-dimethyl urea是nrps-1基因的代谢产物。
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