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硫辛酸属于维生素B类化合物,在丙酮酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶、氨基己酸脱羧酶等多酶复合体中作为辅酶起作用,是已知天然抗氧化剂中效果最强的一种。糖毒性引起的细胞损伤及细胞凋亡是研究糖尿病的一个重要的方面,而硫辛酸的超强抗氧化作用为治疗糖尿病引起的糖毒性损伤提供了新的可能。德国使用硫辛酸治疗糖尿病神经病变已有十余年,硫辛酸在治疗糖尿病的临床实验中效果明显。两栖类动物栖居于复杂多变的潮湿环境中,裸露的皮肤中含有多种化学物质以适应生活环境并调节生理功能。因此,两栖动物是研究促胰岛素释放肽种类和结构特点的理想模型。目前,国际上从两栖类动物体内分离的得到促胰岛素释放肤种类和数量最多。有些促胰岛素释放肽有抑菌效果。中国地大物博,蛙类品种繁多,为蛙皮肤抗菌肽及促胰岛素释放肽提供了有利的来源。抗菌肽能够改善多种由于传统治疗糖尿病的方法所导致的弊端,这使抗菌肽成为改善胰岛素分泌功能、治疗2型糖尿病的新主攻方向。抗菌肽 Dybowskin-2CDYa(SAVGRHGRRFGLRKHRKH)是由本实验室发现并命名的新型抗菌肽,AWRK6(SWVGKHGKKFGLKKHKKH)是本实验室后期改造的肽,实验室前期实验证明该肽具有良好的抑菌活性,具有蛙皮肤促胰岛素释放肽的多种特性功能,能够促进胰岛β细胞的胰岛素分泌。本文以上海现代哈森(商丘药业有限公司)生产的硫辛酸注射液和后期人工合成的抗菌肽Dybowskin-2CDYa、AWRK6为原料,小鼠胰岛β细胞系MIN6为实验对象,主要采用酶联免疫吸附法ELISA及实时荧光定量反转录聚合酶链式反应Real-time RT PCR为研究方法研究硫辛酸注射液和抗菌肽Dybowskin-2CDYa、AWRK6对小鼠胰岛β细胞MIN高糖毒性的保护作用,从蛋白质及基因水平阐述证明硫辛酸注射液和抗菌肽Dybowskin-2CDYa、AWRK6对于胰岛β细胞受损后导致的胰岛素分泌功能降低的恢复作用,实验结果表明添加硫辛酸注射液可使受损细胞分泌胰岛素量增加0.54-1.27ng/ml,基因扩增量增加0.44-3.29ct。添加抗菌肽可使受损细胞分泌胰岛素量增加0.68-1.57ng/ml,基因扩增量增加0.3-3.17 ct。Annexin V-FITC流式细胞术及TUNEL原位凋亡检测实验表明硫辛酸及抗菌肽Dybowskin-2CDYa、AWRK6能够降低因糖毒性导致的细胞凋亡的增加,增强细胞活力,恢复细胞功能。