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目的:EB病毒与人类多种良恶性疾病相关,如单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、移植后淋巴增生性疾病等。长期以来,由于缺乏合适的动物模型,EB病毒与相关疾病等研究进展缓慢。树鼩是一种与灵长类亲缘关系近的小型新兴实验动物,在研究人类疾病方面有着巨大潜力。本课题组在前期研究中初步建成了EB病毒感染树鼩模型,本研究将进一步对树鼩感染EB病毒模型进行探索。我们通过对树鼩进行口鼻接种EB病毒后对其静脉注射环孢素A进行免疫抑制,检测其EB病毒基因、蛋白等表达情况及组织病理改变,探究在此状态下EB病毒在树鼩体内是否具有与人类相似的生物学特性,初步探索树鼩是否可以作为EB病毒相关疾病动物模型。方法:选取健康成年树鼩20只,实验组树鼩16只,对照组4只树鼩。实验组通过口鼻接种液1ml 1.2×10~8copies/ml EB病毒液,对照组以同样方式接种1ml生理盐水,实验组和对照组树鼩观察6周后注射环孢素A 20mg/kg/天,连续注射6周。树鼩定期通过股静脉采血,分离外周血单个核细胞及血清;对树鼩进行解剖,收集重要器官组织。我们对树鼩进行外周血白细胞计数;qPCR技术对树鼩PBMCs中EB病毒拷贝数变化;RT-PCR技术检测树鼩PBMCs中EB病毒相关基因的表达;ELISA检测树鼩血清中抗EB病毒相关抗体的变化;HE染色观察组织病理改变,免疫化学检测树鼩组织中LMP1的表达,原位杂交技术检测组织中EBERs的表达;Western bloting技术检测脾脏EBNA1蛋白的表达。结果:外周血白细胞计数:树鼩在注射CsA进行免疫抑制之后呈明显下降趋势,停止后缓慢回升;实时荧光定量PCR结果:实验组树鼩注射CsA进行免疫抑制之后,实验组所有动物均有明显的EB病毒拷贝数的增加;RT-PCR结果:实验组树鼩EBNA1、EBNA2、EA、BZLF1在注射CsA免疫抑制之后表达增加;ELISA结果:感染EB病毒树鼩在注射CsA进行免疫抑制之后VCA IgG抗体水平较EB病毒感染后更高;HE染色结果:部分实验组树鼩脾脏、淋巴结等组织出现EB病毒相关反应性增生,部分树鼩出现类似EB病毒相关淋巴增生性疾病的表现;免疫组化的结果:在实验组树鼩增生的脾脏、淋巴结、肝脏、肺脏、骨髓等组织检测到LMP1表达;EBERs的结果:在实验组树鼩的脾脏、淋巴结、肝脏、肺脏、骨髓等病变部位检测到EBERs的表达;Western-blot结果:实验组除Ts16外,其余脾脏组织中均检测到了EBNA1的表达。结论:树鼩可通过口鼻接种感染EB病毒,注射CsA免疫抑制之后可导致EB病毒再激活;免疫抑制后树鼩产生类似EB病毒相关淋巴增生性疾病的表现,具有作为EB病毒感染和相关疾病动物模型的潜力。