大豆疫霉(Phytophthora sojae)是一种土传危害性的植物病原菌,由其引起的大豆根腐病能对大豆生产产生极大危害。目前的研究表明该病原菌的致病性易变,新的抗病品种会由于新的致病小种的出现而失去对大豆疫霉病的防治作用。因此,大豆疫霉根腐病如何能够有效的防治始终是大豆生产上的难题,而通过了解其生长发育与致病过程的相关分子机制,发现其生长与致病过程的关键基因,利用这些基因作为分子靶标,从而能够开发有效的病原菌防治策略。转录因子在真核生物的生命活动中扮演着重要的角色,通过开启或关闭某个或某些基因在特定时期的表达,来调控生物有机体的特征与性状,阐明大豆疫霉菌生长发育与致病性的关键是在基因组水平上了解基因的表达与调控,借助转录因子的研究有利于对大豆疫霉菌细胞内基因调控的网络和作用机制的理解。利用抑制差减杂交法对大豆疫霉有性发育初期特异表达基因进行筛选,共筛选出183个序列,经点杂交分析发现,其中41个unigene在卵孢子形成阶段上调表达。说明这些基因在参与卵孢子发育初期阶段的调控,通过大豆疫霉数据库的检索发现这些基因编码的蛋白质涉及能量合成、蛋白质合成、细胞信号传导、细胞壁的生成和转录调节等。选择感兴趣的11个基因,利用RT-PCR测定其在大豆疫霉不同生长阶段的表达情况,结果发现其中有8个基因只在卵孢子形成阶段表达,而Myb DNA-binding domain gene, hypothetical protein gene and Tubulin-tyrosine ligase gene等3个基因在初始即检测到表达,说明这三个基因对卵孢子的早期发育可能起着关键的作用。利用基因沉默表达技术对一个可能参与卵孢子发育的大豆疫霉基因PsMybl进行了功能分析。研究结果发现,该基因含有2个内含子,分别位于其启始密码子下游的第358和469碱基处,大小分别为73bp和78bp,根据碱基序列翻译后的蛋白质由605个氨基酸残基组成,含有一个" SHLQKYR "(Ser-His-Leu-Gln-Lys-Tyr-Arg)保守序列。系统发育分析表明,该转录因子多存在于植物中,且系统发育树中还发现该转录因子在大豆疫霉和植物中的遗传距离较远。利用原生质体转化技术,将PsMybl进行转录基因沉默分析。转录水平的研究发现,相对于野生型,PsMybl基因沉默突变体中PsMybl的相对表达水平明显下降。表型分析发现,与野生型相比,PsMyb1基因沉默突变体中卵孢子的形成受到影响,当(WT)野生型的卵孢子产量为260-270个,PsMyb1沉默突变体的卵孢子产量为10-30个,表明沉默突变体产生的卵孢子量极少,说明PsMyb1对调控卵孢子的发育可能具有重要的作用。