【摘 要】
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目的:探究氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）环境下,HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对小胶质细胞的影响,以及毛蕊异黄酮对小胶质细胞ODG后炎性损伤的预防性保护作用,并明确其作用是否与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关。方法:本次研究采用小胶质细胞BV2和HAPI细胞株进行研究。BV2和HAPI各设置5组,分别为对照组、OGD/R组、毛蕊异黄酮
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目的:探究氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）环境下,HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对小胶质细胞的影响,以及毛蕊异黄酮对小胶质细胞ODG后炎性损伤的预防性保护作用,并明确其作用是否与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关。方法:本次研究采用小胶质细胞BV2和HAPI细胞株进行研究。BV2和HAPI各设置5组,分别为对照组、OGD/R组、毛蕊异黄酮给药组、TAK-242给药组、联合用药组,其中除了对照组之外,其他四组均进行了OGD/R。毛蕊异黄酮组给予不同浓度毛蕊异黄酮(1×10-6 mol/L、2×10-6 mol/L、4×10-6 mol/L)预处理BV2以及HAPI细胞24小时,TAK-242组给予TLR4受体抑制剂TAK-242(10×10-9 mol/L)预处理BV2以及HAPI细胞0.5小时,联合给药组给予毛蕊异黄酮(4×10-6mol/L)和TAK-242(10×10-9 mol/L)两种药物,用药时间与单一给药时间相同。药物处理后,建立OGD/R模型,对BV2细胞进行OGD 4小时,HAPI细胞OGD 2小时。复氧复糖24小时后,cck-8检测细胞活性,western blot检测细胞TLR4、NF-κB、p-NF-κB、IκBα、p-IκBα蛋白表达水平,Elisa检测细胞上清液HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α表达含量,q RT-PCR检测细胞HMGB1、TLR4的m RNA表达水平。结果:OGD/R刺激小胶质细胞,引起小胶质细胞活化且细胞活性降低,HMGB1、TLR4以及NF-κB升高,增加炎性因子释放。毛蕊异黄酮预处理显著提高小胶质细胞活性,降低HMGB1、TLR4以及NF-κB表达,减少炎症因子产生。此外,TAK-242的作用效果与毛蕊异黄酮作用效果类似,二者联合用药进一步加强了OGD/R炎性损伤的保护效应。结论:OGD/R过程中HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路激活并加剧了小胶质细胞的炎性损伤反应。毛蕊异黄酮可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,并且剂量依赖性减轻了OGD/R后小胶质细胞的炎性反应,对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用。
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