【摘 要】
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目的本研究探讨XBP1与Ufm1之间的相互作用关系,以及二者对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡的影响。方法1.利用Real-time PCR及Western Blot分别检测ox-LDL对XBP1
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目的本研究探讨XBP1与Ufm1之间的相互作用关系,以及二者对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞凋亡的影响。方法1.利用Real-time PCR及Western Blot分别检测ox-LDL对XBP1、XBP1s、Ufm1表达的影响。利用流式细胞技术检测ox-LDL对细胞凋亡的影响。2.运用慢病毒技术分别构建XBP1敲除、过表达及Ufm1过表达的稳转细胞株,利用Real-time PCR及Western Blot分别检测ox-LDL处理的三种稳转细胞系中XBP1、XBP1s、Ufm1的表达。用流式细胞技术检测三种稳转细胞系对ox-LDL诱导的细胞凋亡的影响。3.利用Real-time PC R检测ox-LDL激活的凋亡通路,利用Real-time PCR及Western Blot分别检测三种稳转细胞系对凋亡通路的影响。结果1.ox-LDL诱导巨噬细胞XBP1、XBP1s、Ufm1表达增加,并且诱导细胞凋亡。2.干扰XBP1基因表达后,Ufm1表达下降,细胞凋亡增加;过表达XBP1基因,Ufm1表达增加,细胞凋亡缓解。过表达Ufm1基因后,细胞凋亡缓解,但对XBP1表达无影响3.ox-LDL通过CHOP-C-Caspase3通路引起凋亡。干扰XBP1基因表达后,CHOP、C-Caspase3表达增加;过表达XBP1基因后,CHOP、C-Caspase3表达下降;过表达Ufm1基因后,CHOP、C-Caspase3表达下降。结论1.ox-LDL诱导XBP1、XBP1s和Ufm1表达增加,引起细胞凋亡。2.XBP1通过Ufm1缓解ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡。3.ox-LDL通过CHOP通路引起凋亡。
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