麦角固醇是真菌细胞膜的重要组成成分,在青霉素产生菌产黄青霉中,细胞膜中麦角固醇的含量被认为是影响青霉素分泌的重要因素。本实验室首次从产黄青霉中鉴别了两个麦角固醇生物合成的关键酶——C4甲基固醇氧化酶的编码基因,Pcerg25A和Pcerg25B,并对Pcerg25B基因的5’调控区进行了分析。为进一步研究产黄青霉中erg25基因的表达和调控机制,我们对Pcerg25A基因的5’调控区进行了研究。利用大肠杆菌β-半乳糖苷酶编码基因lacZ,构建了含有Pcerg25A基因的5’侧翼区1196bp片段报告载体并转入产黄青霉Wis54-1255,活性测定结果显示,该片段具备启动子转录活性。缺失突变体分析表明,与Pcerg25B基因启动子类似,在Pcerg25A基因5’侧翼区-1196--725bp间存在潜在的负调控元件,而在-725-196bp之间可能含有正调控元件。但Pcerg25A基因启动子仅具备基础转录能力,其调控的β-半乳糖苷酶活性仅为Pcerg25B启动子调控的六分之一。生物信息分析发现,Pcerg25A基因5’侧翼区缺少一些Pcerg25B侧翼区存在的SRE、E-box、及SRE-1等与固醇调控相关的顺式元件。通过构建Pcerg25A和Pcerg25B的杂合启动子,确认了Pcerg25B启动子-779bp--725bp间55bp序列的正调控功能。对该区域的点突变和缺失突变分析,将起增强作用的顺式元件进一步定位于38bp范围内。本研究为揭示Pcerg25基因的调控机制奠定了基础。