目的： 观察槲皮素对巨噬细胞源性泡沫细胞形成过程中脂质聚集及CD36、PPARγ表达的影响，从而探讨槲皮素对泡沫细胞形成的影响机制，为蜂胶抗动脉粥样硬化(AS)的作用提供理论依据。 方法： 1.制备氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)，测定其氧化修饰程度：以Cu2+诱导法催化低密度脂蛋白氧化，采用硫代巴比妥酸反应物法测定其中MDA含量，以确定其氧化修饰程度。 2.建立巨噬细胞源性泡沫细胞模型：分别以50 mg/L、75 mg/L、100 mg/L三个浓度OX-LDL与RAW264.7细胞共同培养，于12 h、24 h、36 h、48 h、60 h五个时间点检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量，以TC减FC得出胆固醇酯(CE)的含量，CE/TC比值>50％作为泡沫细胞的标志，选择制备泡沫细胞模型的适宜条件。 3.实验分组：培养的细胞随机分为五组对照组：正常培养基；模型组：终浓度为75 mg/L的ox-LDL作用48 h；不同浓度槲皮素干预组：分别以终浓度为20μmol/L、40 μmol/L、80 μmol/L的槲皮素与75 mg/L ox-LDL共同作用48 h。 4.油红O染色法观察细胞内脂质蓄积情况。 5.高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内胆固醇含量。 6.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞CD36、PPARγ mRNA的表达。 7.流式细胞仪(FCM)、免疫荧光法检测细胞CD36、PPARγ蛋白的表达。 结果： 1.巨噬细胞源性泡沫细胞模型的建立：75 mg/L ox-LDL与RAW264.7细胞共同培养48 h，细胞内CE/TC比值达到61.63±1.75％，根据CE/TC>50％作为泡沫细胞的标志，此时细胞已泡沫化。 2.油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况：光镜下可见，模型组与对照组相比细胞内脂滴明显增多，不同浓度槲皮素干预组细胞内脂滴与模型组相比明显减少，且呈剂量依赖性。 3.高效液相色谱分析法检测细胞内胆固醇含量：与对照组相比，模型组细胞CE含量明显增高，CE/TC为61.30±2.61％，已形成泡沫细胞；不同浓度槲皮素干预组与模型组相比，CE含量、CE/TC比值均明显下降，且呈剂量依赖性。 4.RT-PCR检测细胞CD36、PPARγmRNA的表达：模型组CD36、PPARγmRNA的表达明显高于对照组；与模型组相比，不同浓度槲皮素干预组CD36、PPARγmRNA表达明显降低，且呈现剂量依赖性。 5.流式细胞仪检测细胞CD36、PPARγ,蛋白的表达：模型组CD36、PPARγ,蛋白的表达明显高于对照组；与模型组相比，不同浓度槲皮素干预组CD36、PPARγ蛋白表达均明显降低，且具有剂量依赖性。CD36、PPARγ蛋白表达变化趋势与其mRNA变化趋势一致。 6、免疫荧光法检测CD36蛋白表达：荧光显微镜下观察，模型组的绿色荧光强度明显高于对照组；不同浓度槲皮素干预组荧光强度低于模型组，且呈剂量依赖关系，与流式细胞仪检测结果基本一致。 结论： 1.ox-LDL可引起RAW264.7细胞内脂质蓄积，从而转变为泡沫细胞。 2.槲皮素能够减少泡沫细胞形成过程中的脂质蓄积，从而抑制泡沫细胞的形成。 3.槲皮素能够使泡沫细胞形成过程中CD36、PPARγ的表达下调。 4.槲皮素可能通过抑制PPARγ的表达而发挥对CD36受体表达的抑制效应，从而减少巨噬细胞通过CD36受体对ox-LDL的摄取，进而抑制动脉粥样硬化中泡沫细胞的形成。