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本实验研究了AT1受体抗体对心血管功能的影响及其机制,实验分以下五项内容:探讨了抗血管紧张素AT1受体抗体的制备过程。利用人工合成的人AT1受体细胞外第二环表位功能肽段,主动免疫大鼠,使其产生高滴度的抗AT1受体抗肽抗体,借以进行抗体对心血管活动的生物学效应研究。
使用抗原肽段对Wistar大鼠进行主动免疫,获取抗AT1受体抗血清,其效价用SA-ELISA方法检测。然后利用MAbTrapKit试剂盒对抗血清中的抗体IgG进行提取和纯化。纯化后的抗体蛋白液混合后,先经PAGE胶凝胶电泳检测其纯度,然后使用考马斯亮兰试剂盒对抗体进行定量。
利用大鼠离体主动脉血管环观察了AT1受体抗体对血管收缩功能的影响,证实该抗体与血管紧张素Ⅱ一样均可剂量依赖性地增加血管环收缩张力,其效应通过对血管上AT1受体的激动剂样刺激效应实现的。综上所述,我们在本研究中证实了AT1受体抗体对心脏有明显的正性肌力效应,和增加血管平滑肌收缩的功能,提示它们可能是参与心血管疾病发病因素之一。