【摘 要】
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经典Wnt信号通路是一条非常保守的信号转导途径,在许多生理过程中都发挥着重要作用,因此,对经典Wnt信号通路的充分了解认识是非常必需的。在从非洲爪蟾胚胎cDNA文库中筛选能够影响经典Wnt信号的基因时,我们发现Skip（ski interacting protein）蛋白的C端缺失型（SkipΔC）能够很好地与经典Wnt信号特异的转录激活调控因子β-catenin协作,激活Wnt信号;而过量表达的
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经典Wnt信号通路是一条非常保守的信号转导途径,在许多生理过程中都发挥着重要作用,因此,对经典Wnt信号通路的充分了解认识是非常必需的。在从非洲爪蟾胚胎cDNA文库中筛选能够影响经典Wnt信号的基因时,我们发现Skip（ski interacting protein）蛋白的C端缺失型（SkipΔC）能够很好地与经典Wnt信号特异的转录激活调控因子β-catenin协作,激活Wnt信号;而过量表达的野生型Skip却对β-catenin信号起抑制作用。对于Skip参与经典Wnt信号通路这一现象,本课题对其作用机制进行了初步的研究。我们使用免疫共沉淀的方法检测到SkipΔC能够与β-catenin相互作用并能稳定β-catenin蛋白,而全长的Skip与β-catenin之间没有相互作用存在。同时,我们也检测到Skip及SkipΔC与LEF1（经典Wnt信号特异的转录调控因子）之间的相互作用。我们还发现Skip不影响β-catenin与LEF1的结合,排除了Skip蛋白过量表达抑制β-catenin与LEF1的结合而起作用的可能性。利用RNA干扰技术,我们发现Skip对于经典Wnt信号通路的传递是必需的。在爪蟾胚胎中,我们发现SkipΔC能够一定程度上模拟经典Wnt信号抑制头部发育,而缺失Skip蛋白后的胚胎神经发育有严重缺陷,并且伴随着轻微的脊索发育缺陷。
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