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目的:1.探讨凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)及血管内皮生长因子(VEGF)血清及组织学表达与原发性肝癌进展的关系;2.与肝癌标志物甲胎蛋白(AFP)进行比较,评价TSP-1及VEGF对肝癌早期诊断的价值。3.探讨Th17相关炎症细胞因子IL-1b、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、IL-22、IL-23与原发性肝癌的关系,评价其对原发性肝癌诊断的意义。方法:1.收集肝癌组血清标本88例及肝癌组织切片53例分别进行TSP-1和VEGF的血清浓度检测及免疫组化染色,其中I期肝癌血清标本20例、组织切片7例,II期肝癌血清标本25例、组织切片18例,III期肝癌血清标本43例、组织切片28例。收集健康对照组血清40例及肝癌癌傍正常肝组织30例。从上述收集的肝癌血清标本中随机抽取51例,其中I期肝癌血清标本10例,II期肝癌血清标本13例,III期肝癌血清标本28例,从健康对照组血清随机抽取29例进行Th17相关炎症细胞因子的检测。2.TSP-1和VEGF血清浓度的检测采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测;3.肝癌组织切片及癌傍组织进行TSP-1及VEGF免疫组化染色,采用即用型非生物素免疫组化方法。4.Th17相关炎症细胞因子IL-1b、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、IL-22、IL-23检测采用液态悬浮芯片技术(Luminex x MAP)进行检测,在Luminex200阅读仪上读取数据。5.TSP-1、VEGF与各细胞因子在肝癌组和健康对照组之间的比较采用独立样本t检验;I期肝癌组、II期肝癌组、III期肝癌组及血清对照组之间的相互比较用SNK-q检验。应用受试者诊断特征曲线(ROC)得到曲线下面积评估TSP-1、VEGF、AFP及细胞因子的预测效能;组织学差异比较采用有序分组资料的线性趋势检验方法;所有数据采用SPSS19.0统计软件进行处理,检验水准为P<0.05。结果:1.肝癌组TSP-1血清浓度明显低于正常对照组(P<0.05);肝癌组VEGF血清浓度明显高于正常对照组(P<0.05)。2.I、II、III期肝癌组血清TPS-1浓度均低于健康对照组,差异具有统计学意义(均P<0.01),III期肝癌组血清TPS-1浓度低于I期肝癌组和II期肝癌组,差异具有统计学意义(均P<0.05),但I期肝癌组和II期肝癌组之间血清TPS-1浓度无显著性差异(P>0.05);正常对照组、I期肝癌组,II期肝癌组各组之间血清VEGF浓度无显著性差异(均P>0.05),但III期肝癌组血清VEGF浓度高于正常对照组、I期肝癌组、II期肝癌组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.以健康对照组和肝癌组血清TSP‐1、VEGF及AFP的浓度为变量做ROC曲线,其曲线下面积TSP‐1为0.893(P<0.05),AFP为0.712(P<0.05),而VEGF为0.568(P>0.05),说明TSP‐1及AFP作为肝癌血清标志物具有统计学意义,而VEGF作为肝癌血清标志物没有统计学意义。根据ROC曲线下面积大小显示TSP‐1的诊断能力较AFP强,且敏感度较AFP高。4.分别以健康对照组与I期肝癌组的血清TSP‐1和AFP的含量为变量做ROC曲线,分析显示TSP‐1和AFP作为标志物诊断早期肝癌,均具有统计学意义,而VEGF作为早期诊断则没有统计学意义。TSP‐1与AFP对应的曲线下面积分别为(0.883,P<0.05)和(0.821,P<0.05),TSP‐1大于AFP说明TSP‐1早期诊断价值优于AFP,选择其曲线上约登指数最大值时为截断点,TSP‐1临界值为132.11μg/ml,敏感度95%特异度70.0%,AFP临界值为19.15ng/ml,敏感度85.0%,特异度75.0%.5.免疫组化显示TSP-1与VEGF均表达在肝癌细胞及正常肝细胞的细胞质中。在肝癌细胞和正常肝细胞内均可以发现TSP-1的阳性表达,但正常肝细胞内的表达要强于肝癌细胞内表达。在肝癌细胞和正常肝细胞内均可以发现VEGF的阳性表达,但肝癌细胞内的表达要强于肝细胞内表达。TSP-1与VEGF组织学表达强度与原发性肝癌进展均存在相关关系且为线性关系(P<0.05):TSP-1在肝癌组织的表达随着原发性肝癌的进展而减弱;VEGF在肝癌组织的表达随着原发性肝癌的进展而增强。6.分别对IL-1b、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、IL-22、IL-23进行独立样本t检验,7个细胞因子中仅IL-17A肝癌组与正常对照组间差异具有统计学意义(P<0.05),其他6个细胞因子肝癌组与正常对照组之间差异没有统计学意义(P>0.05)。7.以IL-17A的血清浓度为变量做ROC曲线,评价其作为肝癌血清诊断标志物的可能性。其曲线下面积(AUC)为0.882(P<0.05),说明IL-17A作为肝癌血清标志物具有统计学意义,选择IL-17A截断点为11.5μg/ml,约登指数最大,其敏感度为68.6%,特异度为93.1%。结论:1.肝癌患者血清中TSP-1浓度随着肝癌的进展逐渐降低,而VEGF浓度随着肝癌的进展逐渐增高,与组织学表达一致;2.TSP-1对肝癌及早期肝癌具有诊断价值。TSP-1对肝癌的诊断效能较AFP强;VEGF对于肝癌及早期肝癌的诊断价值非常有限。3.Th17相关炎症细胞因子IL-1b、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、IL-22、IL-23中仅IL-17A肝癌组与正常对照组间差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析示IL-17A对肝癌具有诊断价值。