桂枝茯苓丸抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖诱导细胞周期阻滞的作用机制研究

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目的研究桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖、细胞周期及其相关周期蛋白Cyclin A2、Cdk2和EGFR蛋白表达的影响,为临床应用桂枝茯苓丸提供理论依据。方法采用MTT比色法检测不同剂量桂枝茯苓丸在不同作用时间下对人乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用;以倒置显微镜观察桂枝茯苓丸对乳腺癌细胞形态的改变;应用流式细胞技术检测桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7周期的影响;采用Western blot技术检测桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7相关周期蛋白Cyclin A2、Cdk2及EGFR蛋白表达的影响。结果1 MTT法检测结果显示,与空白对照组相比,不同剂量桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7作用24h、48h、72h后,各组OD值显著降低(P<0.01),细胞的抑制率提高,且具有时间-剂量依赖性。2倒置显微镜观察发现,不同剂量桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7作用48h后细胞发生不同程度的形态学改变。3流式细胞术检测细胞周期结果显示,与空白对照组相比,1800μg/m L、2700μg/m L剂量桂枝茯苓丸作用人乳腺癌细胞48h后,S期细胞数量显著增加(P<0.01)。4 Western Blot结果显示,1800μg/m L、2700μg/m L剂量桂枝茯苓丸作用48h后,与空白对照组比较,MCF-7细胞中Cdk2蛋白表达下降(P<0.05),EGFR蛋白表达下降(P<0.05),Cyclin A2蛋白表达,1800μg/m L组同空白对照组相比下降无统计学差异(P>0.05),2700μg/m L组同空白对照组相比下降有统计学差异(P<0.05)。结论1桂枝茯苓丸可抑制MCF-7细胞增殖,使其发生不同程度的形态学改变,并且抑制作用具有时间-剂量依赖性。2桂枝茯苓丸可将MCF-7细胞周期阻滞于S期。3桂枝茯苓丸抑制MCF-7细胞增殖,可能与下调EGFR蛋白的表达有关,将细胞周期阻滞于S期的作用机制可能与下调Cyclin A2、Cdk2蛋白的表达有关。
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