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从天然产物中寻找具有杀虫活性的物质,以期直接利用天然杀虫物质或研究天然杀虫植物中活性成分的结构,获取创制新型杀虫剂的天然模板,进行仿生合成,来解决当前化学防治中存在的弊端。我国天然草地面积约有4.17亿h㎡,但有90%的草地在退化,牧草产量、品质下降,载畜能力越来越低,草地毒草化是继荒漠化后第二大造成退化的主要因素。有毒植物抑制牧草的正常生长,降低草地产量和品质,危害放牧家畜的生长发育,牲畜误食毒草引起中毒死亡,严重阻碍草地畜牧业的发展。若能了解有毒植物的毒性、毒理,方可合理利用,变废为宝。
通过对采白天祝天然草地的12种有毒植物对粘虫进行杀虫活性筛选,获得了对粘虫拒食和抑制生长发育较高的节裂角茴香(Hypecoum leptocarpum Hook.f.et Thoms.)提取物,为了尽快地开发利用,本文对节裂角茴香(Hypecoum leptocarpum Hook.f.et Thoms.)的最佳提取方法和提取溶剂、对粘虫的作用方式及对粘虫活性成分的分离与鉴定进行的研究,取得如下结果:
1.通过12种有毒植物的丙酮提取物对粘虫的室内生测结果表明,节裂角茴香、陇蜀杜鹃对粘虫的拒食活性较高,72h对粘虫的拒食活性为81.33%、77.17%;头花杜鹃、千里杜鹃和节裂角茴香对粘虫的胃毒活性较高,72h的胃毒活性都在60.00%以上,对粘虫触杀作用较弱,处理72h后仅有陇蜀杜鹃和千里杜鹃对粘虫触杀活性分别为30.0%和23.3%。筛选出了对粘虫杀虫活性的有毒植物为节裂角茴香。
2.采用室内生物测定方法,测定了节裂角茴香(Hypecoum leptocarpum Hook.f.etThoms.)两种提取法(恒温振荡法和连续回流法)和四种溶剂(无水乙醇、甲醇、正己烷、二氯甲烷)获得的8种提取物对粘虫的生物活性。结果表明:节裂角茴香乙醇提取物对粘虫3龄幼虫具有较强的拒食和抑制生长发育作用,8种提取物对粘虫24h和48h的拒食率均在70%以上,最高达到90.78%;4种溶剂提取物处理粘虫24h的生长发育抑制率在74.21%__91.45%,无水乙醇提取物48h是87.00%,最终化蛹率为23.33%,且生长发育速度缓慢;但对粘虫的胃毒和触杀作用较弱。节裂角茴香对粘虫的拒食活性物质主要集中在植株地上部分。
3.采用恒温振荡法对节裂角茴香生物活性物质进行提取,经柱层析分离后得到3个不同极性的流分,二氯甲烷提取物(弱极性)最少仅占4.20%,其次是正己烷提取物(非极性)占总量的6.04%。甲醇提(极性)取物的含量最高为32.28%,其它大分子物质占57.48%。可见节裂角茴香的大分子物质含量较高。
非极性正己烷流分共检测出30种化合物,主要物质集中在C19到C33之间,这些物质主要来源于植物蜡。1#、3#、4#峰是新植二烯,2#峰是降姥鲛酮主要来源于植物叶绿素α-侧键的降解衍生物;6#、8#、9#、11#、12#、13#峰都是脂肪酸酯系列,11#峰亚油酸乙酯的含量较高;非极性流分物质中富含五环三萜烯酮(27#峰)及乙酸-五环三萜烯酯(29#、30#峰)。新植二烯、降姥鲛酮、脂肪酸酯类、五环三萜烯酮、烯酯等均为具有生物活性物质;弱极性流分中只富集一种具生物活性的C29-15-Nonacosanol(15-二十九醇),是相对丰度最高的一个含羟基脂肪醇化合物,在植物中所占比例为4.20%;极性甲醇流分物质成分共检测出9种有机化合物,均为有机酸,以C16(2#峰)异十六碳酸(棕榈酸)相对丰度较高,占极性流分总量的39.21%,在节裂角茴香整个提取物中占12.66%;3#峰为不饱和脂肪酸亚油酸,含量极少;极性流分中主要是以C14到C28长键脂肪酸系列化合物,其中只有偶数碳脂肪酸,奇数碳脂肪酸未检测出。这些脂肪酸都属于有生物活性的化合物。通过对粘虫的生物活性测定结果表明,对粘虫的拒食和生长发育抑制有很强的作用;活性成分主要存在于极性和弱极流分中。