尿路感染(Urinary tract infection,UTI)是指病原体在尿路中生长繁殖,侵犯尿道粘膜或组织引起的炎症。尿路感染是人类最常见的细菌感染,一般包括膀胱炎、尿道综合症和肾盂肾炎。据报道仅仅在美国每年就有超过1000万的妇女患尿路感染,直接损耗约16亿美元以上。尿路感染大部分是大肠杆菌引起的,几乎占尿路感染的95%,其次就是绿脓杆菌,肺炎克雷伯菌,金黄色葡萄球菌。尿路感染的标准疗法是抗生素治疗,而抗生素的临床治疗失效率在逐渐升高,归因于细菌耐药性的产生。抗生素的滥用,不仅易产生大量耐药菌株,而且对患者肝肾功能极易造成损害。而中药抑菌、利尿、增强机体免疫力等方面综合治疗优势明显,因此迫切需要中药作为抗生素治疗尿路感染的替代药物治疗反复发生的尿路感染。雪荔颗粒是鼓楼医院的一个临床验方,临床用于治疗泌尿系统感染、肾盂肾炎等。该制剂由荔枝草、车前草、紫花地丁、六月雪四味中药组成,有清热解毒、利湿通淋的功效,恰符合中医理论基础——泌尿道感染属湿热淋证的范畴。该制剂经我院二十多年的临床应用,验证了其治疗尿路感染的综合疗效,毒副作用低,且能克服抗感染药物容易产生耐药性的缺点,但缺乏完整的药理学研究。本文以其利尿、抑菌作用为主要药效学指标进行了相关实验研究,为雪荔颗粒的临床应用提供科学依据,并确定其有效部位层进而确定有效成分,对该成分进行提取分离并对该复方进行组织分布研究。1复方雪荔颗粒的药效学研究探讨复方雪荔颗粒利尿、抑菌作用的有效部位,并对其利尿作用机制做初步探讨。采用大鼠代谢笼法研究复方雪荔颗粒原液及各萃取部位的利尿作用,并分析大鼠尿中Na+、K+、Cl-离子的含量；采用浓度梯度稀释法研究雪荔颗粒原液及各萃取部位对不同菌株的最低抑菌浓度(MIC)。利尿实验复方雪荔颗粒原液40 g·kg-1、20 g·kg-1剂量组,乙酸乙酯层40 g·kg-1、20 g·kg-1剂量组能显著增加水负荷大鼠5 h的尿量,且尿中Na+、K+、Cl-离子的含量显著增加；原液对大肠杆菌、金葡菌的MIC分别为0.25 g.mL-1和0.5 g.mL-1,乙酸乙酯萃取层对大肠杆菌、金葡菌的MIC分别为0.5 g.mL-1和1 g.mL-1。因此,复方雪荔颗粒原液和乙酸乙酯萃取层有显著的利尿及抑菌作用,乙酸乙酯萃取层为雪荔颗粒的有效部位,利尿作用机制可能为增加尿中Na+、K+、Cl-离子的排泄。2复方雪荔颗粒有效成分高车前苷的提取分离及结构鉴定从荔枝草中提取分离高车前苷并对其进行纯度测定及结构鉴定,为进一步研究院内验方复方雪荔颗粒的体内药代动力学提供高车前苷标准品。利用硅胶柱色谱方法分离纯化样品并用高效液相色谱测定样品纯度,用理化性质及光谱学方法对其进行结构鉴定。荔枝草体积分数70%乙醇提取物用乙酸乙酯萃取并经硅胶柱色谱分离纯化,得到跟高车前苷Rf值相同的化合物,其纯度达98.2%,经红外光谱、核磁共振波谱、氢谱、质谱鉴定为5,4’-二羟基-6-甲氧基-7-O-β-D-毗喃葡萄糖苷,即高车前苷(homoplantaginin)。本文建立了分离纯化高车前苷的方法,能得到较高纯度的高车前苷,为分离市售紧缺的高车前苷标准品提供了方法学参考,并建立了完整的高车前苷理化鉴别方法及光谱色谱特征图谱。3复方雪荔颗粒的组织分布研究大鼠按20 g·kg-1剂量灌胃给予复方雪荔颗粒之后1 h,4 h,7 h分别取大鼠心、肝、脾、肺、肾、胃和小肠组织,迅速用生理盐水冲洗淤血并置-4℃冰箱保存待测。样品处理后用高效液相测定各组织中高车前苷浓度,并制备各自的标准曲线分别进行方法学考察。结果显示,高车前苷在体内广泛分布,分布较迅速,各脏器的方法学考察指标均符合要求,且高车前苷在胃,肾,肝脏及小肠中均有较高分布。在肾脏中的分布恰符合尿路感染的形成理论,即尿路感染属于湿热淋证的范畴,是细菌在尿中浓集进而达到肾脏和膀胱而形成的。