高度羧基化聚乙烯醇超细纤维膜的制备及其蛋白质吸附性能研究

来源 :东华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:thomas012
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高纯度蛋白质在免疫诊断学、免疫疗法和生物科学研究等领域具有广阔的应用,因而制备具有快速、高效蛋白质吸附性能的材料已成为生物科技领域一个十分重要的研究课题。在蛋白质分离纯化技术中,离子交换层析技术是最有效的分离手段之一,也是很重要的蛋白质纯化方法。采用这种方法分离纯化蛋白质具有很多优点,如分离效率高、操作简单、适用范围广、有利于规模化生产、蛋白质不易失活等。本文通过以聚乙烯醇(Poly(vinyl alcohol),PVA)和顺丁烯二酸酐(Maleic anhydride,MAH)为原料,将静电纺丝技术和原位接枝聚合相结合的方法制备了具有良好蛋白质吸附性能的超细纤维膜。静电纺丝技术可以制备出具有超细纤维尺度和较大比表面积的高分子聚合物纤维膜,通过调控纺丝工艺参数可以很好地控制纤维膜的孔结构,为蛋白吸附提供了良好的前提;原位接枝聚合技术通过对PVA高分子聚合物表面进行改性处理,拓宽了超细纤维膜的应用领域。通过本课题的研究,我们成功制备了具有较大比表面积、较高孔隙率、三维曲孔连通结构和良好机械性能的PVA/MAH超细纤维膜,同时其表面具有丰富的羧酸基团,因而可实现对带正电蛋白质的特异性吸附。经过实验探究发现,MAH的含量是影响合成PVA/MAH超细纤维膜吸附性能的关键性因素,通过对不同MAH含量的PVA/MAH超细纤维膜进行吸附性能测试,结果发现当MAH与PVA的摩尔比为30%,吸附性能达到最佳,对溶菌酶的最大吸附量达到177mg/g;而通过探究吸附时间对吸附性能的影响,发现其吸附平衡时间仅为4小时;对PVA/MAH超细纤维膜进行10次循环吸附性能测试,结果表明其重复使用性能良好。此外,仅在重力产生的相对较小压降(750Pa)下,PVA/MAH超细纤维膜对溶菌酶的饱和动态吸附量可达159mg/g;通过对溶菌酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白、卵清蛋白和胃蛋白酶的混合蛋白溶液进行吸附实验,并结合十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,验证了PVA/MAH超细纤维膜在捕获蛋白的过程中具有选择性。本课题基于超细纤维膜的高比表面积和高孔隙率,制备的PVA/MAH超细纤维膜对溶菌酶的吸附性能较平滑膜材料和商业蛋白质吸附材料有大幅提升,因而有望作为一种高性能纤维基蛋白质吸附材料用于带正电蛋白质的纯化,具有良好的发展前景。
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