【摘 要】
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为了提高双歧杆菌粉剂制备过程中的细胞存活率,该文对双歧杆菌的培养条件、冷冻条件进行了研究,同时确定了相应的检测技术.通过比较法,确定本株双歧杆菌的检测培养基为MRS,检
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为了提高双歧杆菌粉剂制备过程中的细胞存活率,该文对双歧杆菌的培养条件、冷冻条件进行了研究,同时确定了相应的检测技术.通过比较法,确定本株双歧杆菌的检测培养基为MRS,检测用复水剂为0.85﹪的生理盐水,经37℃活化1小时后进行菌落计数,可准确、有效、快捷的反映实际情况.利用提高双歧杆菌的冻干存活率的培养条件为以含0.1﹪吐温的MRS为培养基,37℃培养22小时后收集菌体.采用正交设计结合单因子设计的方法,对实验菌株的冻干保护剂组成、保护作用条件进行了比较实验,得到冻干保护剂的最佳组成为15﹪的脱脂奶粉与5﹪甘油的生理盐水溶液,与菌泥以2：1的比例混合形成pH=8.5的细胞悬液,平衡60min后冷冻.在冷冻过程中,完全冻结是十分必要的.在完全冻结后冷冻时间的长短对冻干存活率影响不显著.在现有条件下采用两步冷冻法比一步速冻法更有利于提高双歧杆菌的冻干细胞存活率.冷冻干燥的成功表现在存活率高、存活期长.综合以上条件,冻干双歧杆菌的细胞存活率可达到79.3﹪.加速寿命实验法的结果表明在45℃的恒温条件下,冻干双歧杆菌粉剂制剂的活菌数下降一个指数的时间为5.2天.
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