大、小兴安岭野生蓝果忍冬的多酚鉴定及体外活性分析

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蓝果忍冬(Lonicera caerulea L.)因其果实和叶片中酚类物质含量丰富,而具有一定的研究价值。本试验以采自大兴安岭的7个地区(加格达奇、新林、宏伟、阿木尔、图强、塔河、漠河)和小兴安岭的5个地区(铁力、翠峦、友好、五营、汤旺河)的野生蓝果忍冬的果实和叶片作为试材,比较了总酚含量(TPC)及总花色苷含量(TAC)差异;使用DPPH·、ABTS+·自由基清除试验,三价铁还原能力(FRAP)和氧自由基吸收能力(ORAC)分析以评估果实与叶片多酚粗提液的抗氧化活性;还测验了其抗?-淀粉酶、抗?-葡萄糖苷酶、抗脂肪酶活性。此外利用固相萃取技术(SPE)将果实和叶片的多酚粗提液进行分离,利用液相色谱与质谱联用法(HPLC-PAD和HPLC-ESI-MS2)鉴定分离得到的非花色苷多酚、花色苷组分,以探究12个地区野生蓝果忍冬果实和叶片中主要的生物活性组分,并比较它们活性成分的差异,希望能够为大、小兴安岭野生蓝果忍冬的开发利用提供理论依据。主要研究结果如下:(1)对总酚含量、总花青素含量分析发现,大、小兴安岭地区野生蓝果忍冬果实总酚含量、总花青素含量均呈现显著性差异(P<0.05)。叶片中的总酚含量(69.91~140.39 mg GAE100 g-1dw)显著高于果实(31.12~108.52 mg GAE 100 g-1 dw),小兴安岭地区果实、叶片的平均总酚含量显著高于大兴安岭地区。果实中的花青素含量远远高于叶片,小兴安岭地区野生蓝果忍冬果实中的总花青素含量(41.26~56.51 mg C3G 100 g-1 dw)高于大兴安岭地区(16.99~52.30 mg C3G 100 g-1dw)。(2)对抗氧化活性分析发现,大、小兴安岭地区野生蓝果忍冬果实和叶片均具有较高的抗氧化活性。不同地区果实的抗氧化能力各有不同。汤旺河和塔河对DPPH·自由基有很强的清除能力,加格达奇与漠河对氧自由基有很好的吸收能力;不同地区叶片在抗氧化能力上有所相似也有不同,加格达奇与友好不仅对DPPH·自由基有很强的清除能力,而且对三价铁也有着强的还原能力;阿木尔对氧自由基有很强的吸收能力。通过对比,我们还发现叶片的抗氧化能力强于果实。(3)对?-淀粉酶、?-葡萄糖苷酶和脂肪酶的抑制能力分析发现,大、小兴安岭地区野生蓝果忍冬果实和叶片均对?-淀粉酶、?-葡萄糖苷酶和脂肪酶有抑制效果却存在一定差异(P<0.05)。友好的果实对α-淀粉酶活性抑制能力最强,其IC50值仅为20.11μg/m L,低于阿卡波糖的IC50值。五营的叶片对α-淀粉酶活性抑制能力最强,IC50值为0.29μg/m L;叶片对α-淀粉酶、?-葡萄糖苷酶抑制活性均强于果实;塔河的果实和漠河叶片对?-葡萄糖苷酶有较强的抑制活性,IC50值分别为7.84μg/m L、0.17μg/m L;五营的叶片和加格达奇的果实对脂肪酶的抑制率很高,分别高达75.70%、97.77%。(4)对相关性分析表明,果实TPC与DPPH法测得的抗氧化活性呈极显著相关关系(P<0.01),与ABTS法测得的抗氧化活性呈显著相关关系,叶片TPC与ORAC法测得的抗氧化活性呈极显著相关关系(P<0.01)。果实与叶片中的TPC与抗?-淀粉酶、抗?-葡萄糖苷酶活性之间均呈正相关关系,而TAC与抗?-淀粉酶、抗?-葡萄糖苷酶活性之间呈均负相关关系;另外,TPC、TAC与抗脂肪酶活性之间存在正相关关系。(5)对果实多酚的鉴定分析表明,12个地区的野生蓝果忍冬果实中均检测到8种花色苷,其中,矢车菊-3-葡萄糖苷的峰面积均最高,其峰面积分别占总花色苷峰面积的91%~93%不等。果实中还检测到30种非花色苷多酚。其中,图强检测到的非花色苷物质种类最为丰富;大兴安岭地区野生蓝果忍冬果实中的非花色苷物质种类多于小兴安岭地区;另外,12个地区野生蓝果忍冬果实中的5-咖啡酰奎宁酸含量均最多,其中加格达奇最丰富,占总非花色苷多酚的47%。(6)对叶片多酚的鉴定分析结果表明,12个地区的野生蓝果忍冬叶片中检测到了1-7种花色苷和33种非花色苷多酚。叶片中非花色苷多酚比果实多了3-咖啡酰奎宁酸、5-p-香豆酰奎宁酸、槲皮素和倭氏藤黄双黄酮这4种物质,而没有三水槲皮素这种物质。图强叶片中的非花色苷物质也最为丰富,为19种。另外不同地区叶片中的非花色苷多酚含量各不相同。
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