壳聚糖在小鼠体内的组织分布与排泄研究

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壳聚糖是自然界中唯一的天然碱性多糖,具有良好的生物相容性和可降解性,已有大量文献报道其具有降血脂、抗癌、提高免疫力等多种生理功效,目前壳聚糖在国内外医药领域得到了广泛关注,但是其在体内的代谢途径尚不清楚。本论文中,采用荧光物质对壳聚糖进行标记之后,研究了壳聚糖在小鼠体内组织中的分布和排泄,并探讨了其在体内的代谢途径。本研究为壳聚糖药代动力学的研究打下重要基础,为其进一步应用于医药提供了重要依据,具有极大的学术意义和经济意义。用异硫氰酸荧光素在不同的反应条件下对分子量50万、脱乙酰度为90%的壳聚糖进行标记。实验结果表明,标记反应的pH值和温度对壳聚糖的标记率影响较明显,标记率分别随着反应溶液pH值和温度的升高而增大;反应时间对标记率影响较小。实验确定标记的条件为25℃,pH9.0下反应3 h,可制得标记率为1.21%的异硫氰酸荧光素标记壳聚糖(FITC-CIS)。采用上述方法制备得到的FITC-CIS给小鼠进行灌胃给药,随后在不同的时间点检测FITC-CIS在体内的分布情况。实验表明,检测方法适用于FITC-CIS在动物体内的药动学研究;FITC-CIS主要分布在小鼠肝、肾和肺中,其中在肾脏中含量最高,在心、脾和血清中含量较低;在胃中停留时间的延长证明了壳聚糖能增加饱腹感;实验检测到肠内容物中含量相对其它部位含量高很多,说明壳聚糖主要经肠道直接排泄。将制备的FITC-CIS给小鼠灌胃给药后,在各时间段收集小鼠的粪尿进行荧光检测,并用HPLC分析代谢物。实验表明FITC-CIS主要经肠道以原药形式从粪便排泄,部分壳聚糖在体内降解后从尿液中排泄出,排泄浓度都在6 h达到最大值。本论文的研究确定了分子量50万、脱乙酰度为90%的壳聚糖的荧光标记条件,采用荧光分光光度计测定和HPLC分析相结合的方法,研究了壳聚糖在小鼠体内的分布和排泄情况,并阐述了壳聚糖的代谢途径,对其进一步的研究具有指导意义。
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