布鲁菌感染中Tim-3对Th17/Treg细胞平衡及其相关细胞因子的影响作用

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目的:研究布鲁菌感染患者中Tim-3对Th17/Treg细胞平衡及其相关细胞因子变化的影响,探讨其在布鲁菌病中的作用。  方法:本研究收集200例于2015年6月到2018年5月就诊于新疆医科大学第一附属医院感染性疾病中心布鲁菌感染患者,其中急性组122例,慢性组78例,同时收集100例健康体检者作为对照组。流式细胞术(FCM)检测Tim-3+T细胞、Th17和Treg细胞占CD4+T细胞百分率。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3、Foxp3、RORγt、IL-17A、IL-6、IL-2、IL-10和TGF-βmRNA的表达情况。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)和流式液相多重蛋白定量技术(CBA)法检测外周血Gal-9、TGF-β、IL-17A、IL-6、IL-2、IL-10细胞因子水平。Pearson法分析Gal-9与IL-17A、IL-6、IL-2、IL-10、TGF-β水平的相关性。Tim-3与Th17/Treg细胞转录因子Foxp3、RORγt及其相关细胞因子IL-17A、IL-6、IL-2、IL-10、TGF-βmRNA表达的相关性。  结果:FCM结果表明:与对照组相比,布鲁菌感染急性期及慢性期患者组Tim-3+T细胞、Th17和Treg细胞占CD4+T细胞均升高,且慢性期高于急性期。qRT-PCR结果表明:与对照组相比,布鲁菌感染急性期及慢性期患者组Tim-3、Foxp3、RORγt、IL-17A、IL-10、TGF-βmRNA的表达水平均升高,慢性期升高较急性期明显,IL-6mRNA的表达则是急性期升高较慢性期明显,而IL-2mRNA的表达在急、慢性期均降低,慢性期更明显。相关分析显示布鲁菌感染急性期及慢性期患者组Tim-3与Th17/Treg细胞的转录因子Foxp3、RORγt及IL-17A、IL-6、IL-10、TGF-βmRNA表达均呈正相关,与IL-2mRNA表达呈负相关。CBA法和ELISA法结果表明:与对照组相比,布鲁菌感染急性期及慢性期患者组Gal-9、IL-17A、IL-10、TGF-β水平均升高,慢性期更明显,IL-6水平则急性期升高更明显;而IL-2水平急、慢性期均降低,慢性期更明显。相关分析显示布鲁菌感染急性期及慢性期患者组Gal-9水平与细胞因子IL-17A、IL-10、TGF-β、IL-6水平呈正相关,与细胞因子IL-2水平呈负相关。  结论:布鲁菌感染患者Tim-3+T细胞、Th17和Treg细胞的升高与布鲁菌感染的病程有关。Tim-3表达升高影响了Th17/Treg细胞因子的产生。Gal-9升高也可能通过影响Th17/Treg细胞因子的产生导致免疫失衡,使布鲁菌不能够被机体有效的清除,致使布鲁菌感染由急性期进入慢性期。
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