卵巢肿瘤是仅位于宫颈癌和子宫内膜癌发病率之后的第三大发病率较高的女性生殖系统的恶性肿瘤,并且在全球范围内卵巢恶性肿瘤的死亡率已高居妇科恶性肿瘤死亡率的首位。由于本病缺乏有效的早期诊断及治疗方法,约有四分之三的患者确诊时已是晚期,且5年的生存率仅是28%左右。近些年来,从世界范围来看卵巢癌的发病率有上升的趋势,因此卵巢癌的病因、诊断及治疗成为人们关注的热点。但目前卵巢癌的发病机制仍不明确,随着分子生物学的快速发展,医学研究者发现了许多与肿瘤发生发展及侵袭过程相关连的因子。前列腺蛋白(Prostasin)是近年来发现的存在于人类精液和输精管中的一种含有高度保守序列的具有和胰蛋白酶一样活性的分泌型丝氨酸蛋白酶,其由前列腺组织的上皮细胞合成,是一种GPI-结合的膜结合蛋白。它参与人体许多正常的生理功能,并且还与多种肿瘤的发生、发展有关。有研究表明丝氨酸蛋白酶具有介导特异蛋白水解的作用,能促进肿瘤细胞生长,提供侵袭转移的基础。然而目前关于Prostasin在卵巢肿瘤中的表达及作用机制等方面的情况仍不清楚,国内罕见相关报道。紧密连接蛋白3(Claudin-3, CLDN-3)起初被称为RVP1,是紧密连接蛋白(Claudin)家族中的一个蛋白亚型,其由219个氨基酸所组成,在上皮细胞与细胞之间的信号传输、物质转运过程中具有接合作用,同时为细胞的粘附功能提供了基础。目前研究认为,Claudins异常表达可能参与了细胞粘附性丢失、组织分化变差及肿瘤细胞侵袭性增加等机制的调控过程,与多种肿瘤的发生及侵润有关。然而Claudin-3在卵巢癌的发生发展及恶性演进过程中所起的作用及其机制尚不完全明确,有待进一步研究。目的本实验通过采用免疫组化的方法检测Prostasin和Claudin-3在卵巢上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达情况,分析二者在卵巢上皮性癌中的表达差异与组织各个病理特征之间的关系,探讨二者在卵巢癌发病发生发展过程中的作用及相关性,以期为卵巢癌的临床诊断、治疗和预后判断等研究提供有力的理论基础并为卵巢癌的治疗寻找新的靶点。材料与方法1.实验对象：选取郑州大学第三附属医院2008年10月-2011年02月收治住院并行手术切除且在病理科存档的卵巢上皮性肿瘤组织标本90例,其中包括50例卵巢上皮性癌,20例卵巢交界性肿瘤,20例卵巢良性肿瘤。根据组织病理学分型将50例卵巢上皮性癌分为三组,其中包含浆液性囊腺癌27例,黏液性囊腺癌15例,子宫内膜样癌8例。另选取同期20例因子宫脱垂或子宫肌瘤行全子宫切除同时行卵巢切除的正常卵巢组织作为对照。所有标本病理诊断均经本院两位病理专家确诊。患者平均年龄52.2岁(36-70岁),且术前均无化疗放疗及免疫治疗史。2.实验方法：本研究采用免疫组织化学SP法检测Prostasin蛋白和Claudin-3蛋白在50例卵巢上皮性癌、20例卵巢交界性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤、20例正常卵巢组织中的表达情况,分析二者的表达差异与卵巢上皮性癌各个临床病理特征的关系,并解析Prostasin蛋白和Claudin-3蛋白二者表达的相关性,探讨二者在卵巢上皮性癌发生发展及恶性演进过程中的作用。3.统计学方法：统计分析采用SPSS17.0统计软件进行实验数据处理,其中计数资料采用卡方检验,Prostasin和Claudin-3两变量的相关性采用Spearman等级相关检验进行分析,检验水准α=0.05。结果1Prostasin的表达Prostasin主要在细胞质中表达,其阳性细胞在显微镜下观察为棕黄色染色。1.1Prostasin在不同卵巢组织中的表达情况Prostasin在卵巢上皮性癌中的阳性表达率明显高于卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达,且总体间的差异具有统计学意义(P<0.05)。1.2Prostasin在卵巢上皮性癌组织病理分级中的表达情况Prostasin在15例高分化G1级、18例中分化G2级和17例低分化G3级中的阳性表达率分别为40%、77.8%和88.2%,三组间总体表达差异具有统计学意义(P<0.05)。1.3Prostasin在卵巢上皮性癌组织组织学分型中的表达情况Prostasin在卵巢上皮性浆液性癌组中的表达最强(77.8%),在黏液性卵巢癌组中的表达最低(60%),二者与在子宫内膜样癌组的表达率分别进行组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。1.4Prostasin在卵巢上皮性癌组织临床分期中的表达情况Prostasin在卵巢上皮性癌中随着临床分期的升高,其阳性表达率也升高,在21例临床Ⅰ～Ⅱ期和29例Ⅲ～Ⅳ期组织中的阳性表达率分别为52.4%和82.8%,总体间表达的差异有统计学意义(P<0.05)2Claudin-3的表达Claudin-3蛋白主要在细胞膜和细胞浆中表达,尤以细胞浆为重,其阳性细胞在电镜下观察呈棕黄色或棕褐色染色。2.1Claudin-3在不同卵巢组织中的表达情况Claudin-3在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组、卵巢交界性肿瘤组和卵巢上皮性癌组中表达率依次升高,其差异具有统计学意义(P<0.05)。2.2Claudin-3在卵巢上皮性癌组织病理分级中的表达情况Claudin-3在卵巢上皮性癌中的G1组、G2组及G3组中的阳性表达率分别为40%、66.7%和82.4%,三组间总体表达差异具有统计学意义(P<0.05)2.3Claudin-3在卵巢上皮性癌组织学分型中的表达情况Claudin-3在卵巢上皮性浆液性癌、黏液性癌及子宫内膜样癌组中的阳性表达率分别为74.1%,60.0%,37.5%,各组间的表达差异均无统计学意义(P>0.05)2.4Claudin-3在卵巢上皮性癌组织临床分期中的表达情况Claudin-3在卵巢上皮性癌中的临床Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率分别为47.6%和75.9%。且随着临床分期的升高,其阳性表达率也升高,并总体间表达的差异有统计学意义(P<0.05)3Prostasin和Claudin-3在卵巢上皮性癌组织中的相关性在50例卵巢上皮性癌中Prostasin表达阳性为35例,而Claudin-3表达阳性为32例。Prostasin和Claudin-3在卵巢上皮性癌中的表达呈正相关(r=0.386,P<0.05)。结论1Prostasin和Claudin-3的表达升高与卵巢上皮性癌的发生、发展及侵袭恶变密切相关。2Prostasin和Claudin-3在卵巢上皮性癌中的表达呈正相关性,提示二者可能通过协同作用促进了卵巢癌的恶性发展及演变。