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镉能诱导机体内多种细胞发生凋亡.进行镉诱导细胞凋亡的研究对治疗由镉引起的各种疾病有重要意义.该文对镉诱导细胞凋亡发生的机制做了如下的研究:1.镉引起SD大鼠肾细胞的凋亡及钙稳态的失调.在37℃、5﹪C0<,2>条件下,离体SD大鼠肾细胞分别在含不同浓度氯化镉和亚硒酸钠加氯化镉的FD培养液中孵育3h后,用吖啶橙/溴乙锭双荧光染色法检测细胞的凋亡率,以Fluo-3/AM为探针研究胞内游离钙离子浓度的变化.结果显示:不同浓度的镉离子能不同程度地诱导SD大鼠肾细胞的凋亡,同时还能引起不同程度的细胞内游离钙离子浓度增加,并呈现剂量效应正相关.低浓度的亚硒酸钠有一定的降低镉离子诱导细胞凋亡的作用.提示:镉能引起离体SD大鼠肾细胞的凋亡并引起胞内钙稳态的失调.2.镉诱导HEK293细胞胞内钙稳态的失调引发细胞凋亡.通过吖啶橙/溴乙锭双荧光染色法检测细胞凋亡,并通过MTT法检测细胞生长抑制;以Fluo-3/AM和Fura-2/AM为探针检测胞浆内游离钙离子浓度([Ca<2+>]<,i>)的变化;使用钙调磷酸酶试剂盒测定镉对钙调磷酸酶活性的影响.结果显示:镉诱导HEK293细胞的凋亡和生长抑制呈浓度依赖性;镉通过引发胞内钙库的释放后引起胞外钙离子的内流;钙信号的阻断剂能显著的抑制镉引起的细胞凋亡;镉使胞内钙调磷酸酶的活性显著增加.提示:镉诱导胞内钙稳态的失调可能在镉引发细胞凋亡过程中起重要作用.3.镉诱导HEK293细胞线粒体细胞色素C释放引起细胞凋亡.分别以罗丹明123和DCFH-DA为探针检测细胞的线粒体膜电位水平和胞内活性氧中间体水平;用免疫印迹技术检测细胞线粒体中细胞色素C释放到胞质的情况.结果显示:镉处理能诱导HEK293细胞线粒体膜电位水平下降;活性氧中间体水平升高;并伴随细胞色素C的释放.提示:镉可能通过某些途径引起线粒体膜电位的下降,下降的膜电位伴随着线粒体膜通透性的变化,并将原本存于线粒体中的ROS和细胞色素C释放到胞质中,从而触发了细胞凋亡.