由食源性致病菌引起的疾病,是对全球卫生健康的最大威胁之一。其中,大肠杆菌O157:H7是导致食源性疾病暴发的最常见的埃希式大肠杆菌,引起了研究人员的广泛关注。因此,需要对病原体水平进行实时和持续的监测,以获得有价值的信息,进而协助各卫生机构指导预防和控制与病原体有关的疫情。现阶段致病菌绝大部分是通过传统培养技术来检测的,这些技术对专业人员的依赖性高,受处理时间和现场环境的限制。免疫层析试纸条方法,是一项将免疫标记技术和层析技术将结合的检测方法,具有制造简单、操作方便、成本低廉、特异性强、等其他方法无法比拟的优点而被备受关注,而且基于纳米技术的免疫层析技术,由于纳米材料其独特的光学性质,在早期快速检测食源性致病菌中开辟了新途径。为了更好的监测大肠杆菌O157:H7,开发了两种灵敏、高效的新型免标记免疫层析快速检测方法,主要研究结果如下:（1）基于CuS纳米簇新型免标记免疫层析试纸条检测方法的构建及其在食品中大肠杆菌O157:H7污染检测中的应用。本课题找到了一种可以直接与病原体静电吸附的分子识别显色剂用于构造“纳米探针-致病菌-抗体”新型夹心结构,既不需要配对抗体,又不需要探针的标记过程,以此开发了基于纳米材料和抗体双重识别的大肠杆菌O157:H7免疫层析检测方法。由于CuS纳米簇合成步骤简单,并且与表面呈现负电荷的大肠杆菌O157:H7之间存在良好的静电吸附能力,只需将CuS纳米簇与病原菌在室温下孵育一段时间就会得到新型的探针。对材料浓度、免疫时间等条件的优化后,在检测过程中,使用抗大肠杆菌O157:H7特异性抗体作为T线上的识别因子,实现对大肠杆菌O157:H7的灵敏检测。最终的肉眼灵敏度为10~4CFU/m L,与其他致病菌无交叉反应,特异性良好,用于实际样品牛肉、鸡肉、牛奶和蜂蜜中的检测,均出良好的检测性能,肉眼检出限分别为10~5、10~4、10~4和10~5CFU/m L,回收率在80%-120%之间,有良好的实际应用价值。因此,所开发的CuS纳米簇新型免标记夹心免疫层析试纸条提供了一种简单,可靠、快速和灵敏的大肠杆菌O157:H7检测方法。（2）基于Fe3O4@CuS纳米复合材料新型免标记比色-光热双读出的免疫层析试纸条检测方法及其在食品中大肠杆菌O157:H7污染检测应用。为进一步提高检测的灵敏度,利用纳米材料与致病菌之间的静电吸附能力以及材料优异的光热性能,我们通过简单的水热化学沉积法合成了Fe3O4@CuS纳米复合材料。在808 nm红外光的辐射下,材料温度升高,利用红外照相机记录温度变化情况,再此基础上开发了免标记双通道读出的新型免疫层析试纸条检测技术。试验中优化了Fe3O4@CuS的最佳浓度、体积、孵育时间和免疫反应时间。在最佳的测试条件下,对目标物大肠杆菌O157:H7的高灵敏度比色和光热检测具有宽检测范围（10~2-10~8CFU/m L）和高特异性,并且光热免疫层析试纸条的灵敏度检测限为10~2CFU/m L,肉眼灵敏度检出限是10~3CFU/m L。此外,在牛肉、鸡肉、牛奶和蜂蜜中的检出限分别达到了10~3、10~2、10~3和10~2CFU/m L,回收率在83-120%之间。通过这种技术,证实了免疫层析技术在检测复杂食品样品中病原菌的可靠性。