论文部分内容阅读
目的：分析SPACA5/Spaca5基因在人及小鼠中的表达特点。方法：通过RT-PCR实验明确SPACA5/Spaca5基因分别在正常成人及成年小鼠各组织表达特点及Spaca5基因在9、14、18、20、22、25、28、30、35天和6周龄小鼠睾丸中的表达变化特点。免疫组织化学分析SPACA5/Spaca5蛋白分别在正常成人及成年小鼠睾丸中的表达定位。采用多种生物信息学方法对该基因进行生物信息学分析。结果：RT-PCR结果显示，Spaca5基因在小鼠18天龄及之前的睾丸中没有表达，20天睾丸中开始持续高表达。SPACA5/Spaca5基因在多种正常人及小鼠组织中呈现睾丸特异性表达。免疫组织化学实验发现SPACA5/Spaca5表达于长形精子细胞。经生物信息学分析，SPACA5蛋白为属于典型的C型溶菌酶，其蛋白的信号肽剪切位点在第21-22个氨基酸之间。小鼠和人SPACA5蛋白氨基酸序列有高度相似性和同源性，显示该基因在哺乳动物中高度保守。结论：SPACA5/Spaca5均为睾丸特异性表达基因，Spaca5基因特异的在20天龄以后小鼠睾丸中表达，SPACA5/Spaca5在人和小鼠睾丸中特异性表达于长形精子细胞，显示其可能在生精过程发挥重要作用。目的：肿瘤细胞常常反常的表达正常的睾丸蛋白,而这些蛋白在正常时仅表达于睾丸组织，所以可以成为免疫治疗潜在的靶点。在本实验中我们鉴定SPACA5是在膀胱癌中一种新的癌-睾丸抗原。方法：采用定量RT-PCR分析SPACA5基因在20对膀胱癌及癌旁正常膀胱组织中的表达特点。采用免疫组织化学分析SPACA5蛋白在正常膀胱组织和65例膀胱癌中的表达特点。运用统计学方法分析SPACA5的表达量和病例临床特点之间的关系。结果：定量RT-PCR结果显示：SPACA5基因在20对膀胱癌及癌旁正常膀胱组织有45%的膀胱癌组织表达，癌旁正常膀胱组织中无表达。免疫组织化学分析表明：SPACA5在正常膀胱组织中无表达，约38.46%的膀胱癌病例中有SPACA5表达，SPACA5蛋白表达于膀胱癌细胞胞浆中，且其显著表达于病理分级高的病例中(p=0.035)。结论：SPACA5是一种新的癌-睾丸抗原，异常的表达于部分膀胱癌病例中，显著表达于病理分级高的病例中，其可成为膀胱癌免疫治疗新的靶点。