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蜡酯是由C12以上偶数碳原子的长链脂肪酸和长链脂肪醇所形成的酯,按其化学结构可分为不饱和蜡酯和饱和蜡酯。饱和蜡酯来源较广泛,包括动物蜡和植物蜡,不饱和蜡酯也叫液蜡,具有生物可降解性,在高温、高压和高速下具备良好的润滑性,可以应用在高级润滑油和高级润肤油中。蜡酯在生物体内含量较少,主要来源是鲸蜡油和霍霍巴油,目前不饱和蜡酯的资源紧张,无法满足各行业的需求。本课题的目的就是在无溶剂体系中,以脂肪酶Candida sp.99-125为催化剂,催化天然的脂肪酸脂肪醇酯化反应合成天然不饱和蜡酯的替代品。本文首先利用50 mL的具塞锥形瓶,以试剂级油酸和十六醇为底物对脂肪酶催化酯化反应合成蜡酯的反应条件进行优化,分别对反应体系、酸醇摩尔比、酶用量、反应时间、反应过程除水进行了考察。结果表明:在无溶剂体系中,酸醇摩尔比1/0.9,固定化Candida sp.99-125酶布用量10%(w/w),开口反应8h后,转化率均在95%以上,最高可达99%。将反应逐级放大至1L的搅拌式反应器中,最优反应条件为:无溶剂体系,酸醇摩尔比1/0.9,开口反应除水,固定化酶布用量2.5%(w/w),酶粉用量0.7-0.8% (w/w),搅拌转速200-250 rpm,温度40℃,反应24 h转化率达95%以上。固定化酶布和酶粉都可以重复使用6-7个批次。本文还研究了脂肪酶催化混合脂肪酸和混合脂肪醇合成蜡酯的反应,在50 mL的具塞锥形瓶中,油酸与八碳以上偶数碳原子的混合脂肪醇反应,反应条件同上,最终的转化率仍在95%以上;在500 mL的搅拌式反应器中,以工业级的豆油脂肪酸和十六醇为反应底物,同样得到了95%以上的转化率;Candida sp.99-125月旨肪酶还可以催化羊毛脂酸与短链烷醇反应,在优化的反应条件下,酶催化羊毛脂酸与正戊醇反应的转化率达80%,可见,该酶可以应用在羊毛脂改性中。本文还在前人的工作基础上进一步优化了酯化反应后产品的分离提纯工艺。通过乙醇萃取除十六醇,饱和或近饱和碳酸钠溶液除脂肪酸,得到了不同醇(8C-16C)对应的蜡酯,测试它们的理化性质,结果表明:合成的不饱和蜡酯可以替代天然鲸蜡油。