研究背景：相关研究表明,在急性心肌缺血时心肌组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、去甲肾上腺素(NE)水平都明显升高,肾上腺素能系统与感觉神经都参与了心肌缺血的损伤与保护,然而其作用机制尚未阐明。本实验欲从细胞水平阐述其作用,及其机制。研究目的：观察降钙素基因相关肽(CGRP)对去甲肾上腺素(NE)诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响,及其与PKA、PKC信号传导系统的关系。研究内容及方法：(1)心肌细胞的培养及鉴定。实验选用1-3d龄的Sprague-Dawley (SD)大鼠建立新生大鼠心肌细胞体外培养模型,采用免疫细胞化学染色(SABC法)对心肌细胞进行鉴定。(2)CGRP对NE诱发的心肌细胞凋亡的影响采用NE与PKA抑制剂H89、CGRP、CGRP受体拮抗剂CGRP8-37配伍,形成以下组合：对照组(C组)、NE(10-5M)组、NH(NE 10-5M+H893×10-5M)组、NC组(NE 10-5M+CGRP 10-8M)、NC8组(NE 10-5M+CGRP 10-8M+CGRP8-3710-7M),用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,计算心肌细胞凋亡率。(3)CGRP对NE诱导心肌细胞PKA信号途径的影响分组同实验2,提取培养心肌细胞蛋白,用无反射性试剂盒检测各组PKA活性(4)CGRP对NE诱导心肌细胞PKC信号途径的影响分为C组、NE组、NC组、NC8组(具体同实验2),提取培养心肌细胞蛋白,用无反射性试剂盒检测各组PKC活性实验结果(1)心肌细胞培养成功,可见同步化搏动心肌细胞,免疫组化鉴定成功,98%以上细胞为心肌细胞。(2)a：与对照组相比,NE组、NC8组细胞凋亡率显著升高；b：与NE组比较,NH组、NC组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。(3)a：与对照组相比,NE组、NC组PKA活性升高,NH组PKA活性降低(P<0.05)；b：.NC组、NC8组与NE组的差别无统计学意义(P>0.05)；c：.NC组与NC8组的差异有统计学意义(P<0.05)。(4)a：与对照组比较,NE组、NC组、NC8组PKC活性均增高(P<0.05)；b：NE组、NC组、NC8组之间PKC活性无明显差异(P>0.05)。结论1.PKA信号通路可能参与NE诱导心肌细胞凋亡。2.CGRP有拮抗NE诱导的心肌细胞凋亡作用。3.CGRP不是通过对PKA或者PKC信号通路的调节,抑制NE诱导心肌细胞凋亡。其作用机制有待探讨。