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[目的]1.应用基因芯片技术筛选急性髓系白血病(AML)患者差异表达的长链非编码RNA。2.应用实时定量PCR分析在AML患者骨髓单个核细胞中长链非编码RNA ZEB2-AS1的表达特征,并分析其与临床预后及复发的相关性。3.研究长链非编码RNA ZEB2-AS1对人AML白血病细胞株(THP-1、NB4细胞)生物学功能的影响,并探讨其可能的机制。[方法]收集近年来经我院MICM分型确诊的AML患者骨髓单个核细胞标本共60例,采用Agilent单通道表达谱芯片技术分析AML患者中长链非编码RNA的差异表达谱,并进行功能预测。通过芯片并结合体外细胞株定量检测技术,筛选出与AML预后可能相关的长链非编码RNA ZEB2-AS1。从而利用实时定量PCR再对62例AML患者和正常人、非恶性血液病对照组(如缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜)中长链非编码RNA ZEB2-AS1的表达进行检测,分析其表达量与初诊的白细胞数量(WBC)、染色体异常、基因突变、化疗疗效、疾病预后、复发及长期生存情况之间的相关性,并分析其差异化表达量对预后的影响。再者,利用分子生物学相关技术,在体外人AML白血病细胞株(THP-1、NB4细胞)中,干扰其长链非编码RNA ZEB2-AS1的表达,进而检测其相关肿瘤生物学行为的改变,及其关键分子表达的变化,从而初步探讨长链非编码RNAZEB2-AS1在AML疾病发生发展中,对肿瘤细胞生物学功能的可能调控机制。[结果]1.应用基因芯片技术筛选AML患者差异表达的长链非编码RNA基因芯片结果显示,60例初诊AML患者各核型之间有差异性表达的lncRNAs共有2716条,各AML核型异常间差异性表达的lncRNAs主要集中在1号、7号、15号、2号染色体上。在各种差异性表达的lncRNAs中,lncRNA ZEB2-AS1在合并11q23异常的AML患者中的表达明显高于其他核型,而在合并t(15;17)的M3患者中其表达水平明显低于其他AML患者(均P<0.05)。2.实时定量PCR检测lncRNA ZEB2-AS1表达的差异性及其临床意义实时定量PCR结果显示,与正常人和非恶性血液病患者相比,AML患者中lncRNAZEB2-AS1的表达异常升高(P<0.05)。AML中合并11q23核型异常的患者其lncRNA ZEB2-AS1表达量显著高于其他AML患者(P=0.0049),合并t(15;17)核型异常的M3患者其lncRNA ZEB2-AS1表达量显著低于其他AML患者(P=0.0003)。初诊高白(WBC>=50*10E9/L)的 AML 患者(非 M3)其 lncRNA ZEB2-AS1表达量显著高于非高白细胞的AML患者(P=0.0012)。预后差的AML患者其lncRNA ZEB2-AS1表达量显著高于预后良好和预后中等的AML患者(均P<0.05)。lncRNAZEB2-AS1低表达的AML患者其总生存率(OS)和无病生存率(DFS)均显著高于高表达患者(均P<0.05)。此外,lncRNA ZEB2-AS1高表达患者化疗诱导完全缓解率显著低于lncRNAZEB2-AS1低表达患者(P=0.031)。再者,在lncRNA ZEB2-AS1低表达患者中,异基因造血干细胞移植的OS和DFS显著高于化疗患者(P=0.037 和 P=0.049)。3.干扰lncRNA ZEB2-AS1的表达对体外白血病细胞株生物学行为的影响通过RNA干扰及细胞培养技术,利用siRNA转染下调人白血病THP-1细胞株lncRNA ZEB2-AS1的表达后,可以有效抑制AML细胞的侵袭和迁移,这与下调ZEB2和上调E-cadherin表达密切相关。过表达NB4细胞中lncRNAZEB2-AS1后,可显著促进AML细胞的侵袭和迁移。lncRNA ZEB2-AS1表达量的改变,对体外白血病细胞的凋亡和增殖无显著影响。[结论]1.长链非编码lncRNAZEB2-AS1在急性髓系白血病中表达异常升高。2.初诊AML患者骨髓lncRNA ZEB2-AS1的表达量与患者的预后及生存密切相关,lncRNA ZEB2-AS1可以考虑作为改善AML常规风险分层系统和优化治疗策略的候选标志分子。3.lncRNA ZEB2-AS1异常高表达可增强体外AML细胞的侵袭和迁移,并与上调ZEB2和下调E-cadherin的表达密切相关。