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目的移植肾难治性排斥反应是影响移植物长期存活的的主要原因之一。难治性排斥反应通常对目前的常规免疫抑制治疗不敏感,最终将导致移植物的失功。由供体特异性抗体介导的体液性排斥反应是难治性排斥反应的一种类型,其作用机制、临床诊断及防治的研究都已逐步深入。移植肾组织中肾小管周围毛细血管的C4d沉积是体液排斥反应的标识之一,对临床判断体液性排斥反应的发生,推测移植肾预后具有重要的意义。本研究通过检测C4d、CD20、CD38、CD138在难治性排斥反应移植肾组织中的表达情况,分析CD20阳性B细胞及CD138阳性浆细胞在难治性排斥反应移植肾组织中的比例,从而分析B细胞、浆细胞与体液免疫排斥之间的相关性,并探讨局部聚集性浸润的B细胞与浆细胞在移植肾丢失中的作用,为难治性排斥反应的诊治提供一定的依据。方法采用解放军总医院第309临床部全军器官移植中心收治的患者,共分成两组。第1组为1989年06月-2006年12月因排斥反应常规治疗无效致移植肾失功并行移植肾切除患者40例为研究对象。其中男性28例,女性12例。第2组为2006年01月-2007年12月因血清肌酐增高、尿量减少,诊断移植肾急性排斥反应,用甲基强的松龙冲击治疗逆转的20例患者的冲击治疗前移植肾穿刺活检标本。其中男性13例,女性7例。两组标本均采用石蜡切片、HE染色,应用抗C4d多克隆抗体以及抗CD20、CD38、CD138单克隆抗体行免疫组织化学染色检测组织中C4d、CD20、CD38和CD138的表达情况,通过Spearman等级相关统计分析四者之间的相关性,同时运用Log-Rank检验及Kaplan-Meier生存曲线统计移植肾的存活时间,分析上述因子表达对移植肾存活时间的影响。结果移植肾失功组中检测到C4d阳性17例(42.5%),CD20阳性19例(47.5%),CD38阳性25例(62.5%),CD138阳性23例(57.5%);C4d单阳性10例(25.0%),CD20单阳性12例(30.0%),C4d、CD20双阳性7例(17.5%)。其中超急性排斥反应5例,检测到C4d阳性2例(40%),CD20阳性1例(20%),CD38阳性1例(20%),CD138阳性1例(20%);急性排斥反应23例,检测到C4d阳性10例(43.4%),CD20阳性13例(56.5%),CD38阳性15例(65.2%),CD138阳性14例(60.9%);慢性排斥反应12例,检测到C4d阳性5例(41.7%),CD20阳性5例(41.7%),CD38阳性9例(75%),CD138阳性8例(66.7%)。排斥逆转组中C4d阳性2例(10.0%),CD20阳性2例(10.0%),CD38阳性1例(5%)、CD138阳性3例(15.0%)。失功组中超急性排斥反应、急性排斥反应和慢性排斥反应病例中的C4d、CD20、CD38、CD138阳性率并无明显差异,但失功组与逆转组急性排斥反应病例中C4d阳性率比较P=0.0357,CD20阳性率比较P=0.0041,CD38阳性率比较p=0.0002,CD138阳性率比较P=0.0059。失功组中12例C4d阳性移植肾存活时间＜5年(70.6%),5例存活时间＞5年(29.4%),C4d阳性移植肾的5年以上存活率明显减低。经Spearman等级相关分析,失功组中C4d与CD38、CD138表达存在相关性(P＜0.05和P＜0.01),而与CD20表达不存在相关性(P＞0.05)。Log-Rank生存分析结果表明,C4d、CD20双阳性移植肾存活时间明显低于C4d单阳性及CD20单阳性的移植肾存活时间(P＜0.05)。结论C4d阳性的体液排斥机制,以及CD20阳性B细胞、CD138阳性浆细胞在移植肾中的聚集性浸润都是影响移植肾长期存活的危险因素;C4d沉积与CD20阳性B细胞群的浸润同时存在的移植肾,其存活时间明显减低,提示着移植物预后较差;体液性排斥反应与B细胞群阳性浸润的排斥反应虽同属于激素耐受型难治性排斥反应,但C4d与CD20表达不存在相关性,提示两者可能通过不同的机制参与排斥反应过程;C4d与cD38、CD138表达存在相关性,提示移植肾中聚集性浸润的浆细胞很可能通过局部分泌抗体的方式参与体液排斥反应的发生和发展过程。