咖啡豆提取物对营养肥胖型大鼠减肥的作用及机制初探

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目的:比较两种咖啡豆提取物(CBE(一)和CBE(二))对营养肥胖模型大鼠的减肥作用,并对其中CBE(一)的减肥的作用机制进行了初步研究,为临床应用作前期基础研究。方法:按“国食药监保化[2012]107号”文附件8减肥功能评价方法进行造模并给药,观察给药组与模型对照组(MC)的情况,记录CBE(一)和CBE(二)各组大鼠的体重变化、摄食量;试验结束,测定各组大鼠体内脂肪重量、全自动生化仪测定CBE(一)血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的值;用Elisa法检测脂联素(APN)、瘦素(LP);试剂盒检测游离脂肪酸(NEFA)的含量;用Western blot法检测各组大鼠肝脏组织AdipoR2、p38、PGC-1、PPARγ蛋白的表达和脂肪组织中AdipoR2、PGC-1、PPARγ蛋白的表达以及肌肉组织中AdipoR2、PGC-1的表达;用RT-PCR法测定大鼠肝脏组织中AdipoR2、p38、PPARγ、SREBF1、SREBF2基因表达水平。结果:大鼠营养肥胖模型成功建立,两种咖啡豆提取物均有减肥作用。具体表现在:与正常对照组(NC)大鼠比较,模型对照组(MC)的体重终重、体重增重和脂体比有明显差异(P<0.01);与MC比较,两种给药组大鼠体重终重、体重增重和脂体比均下降,均数间差异均有显著性(P<0.01)。与NC比较,MC大鼠TC、TG、LDL均升高,HDL含量下降,差异有显著性(P<0.01);与MC比较,CBE(一)(133mg·kg-1、267 mg·kg-1、800 mg·kg-1)三个剂量组TC、TG均降低,HDL均升高,其中133 mg·kg-1、267 mg·kg-1两个剂量组LDL无明显变化,而800 mg·kg-1组LDL降低(P<0.05)。同时与NC相比,MC大鼠APN均明显降低(P<0.01),LP增多;与MC相比,CBE(一)给药组大鼠APN增多(P<0.01或0.05),LP降低。Western blot实验表明,与MC相比,CBE(一)给药组大鼠肝脏组织中AdipoR2、p38、PGC-1、PPARγ蛋白表达增多,脂肪组织中AdipoR2、PGC-1、PPARγ蛋白表达增多,而肌肉组织中AdipoR2、PGC-1蛋白表达增多,未检测出PPARγ蛋白的表达。RT-PCR结果表明,大鼠肝脏SREBF1、SREBF2 mRNA显著降低,而AdipoR2、p38、PPARγmRNA显著增多。结论:按“国食药监保化[2012]107号”文附件8减肥功能评价方法进行试验,两种咖啡豆提取物均有减肥作用,其中其作用机制可能是通过升高血清APN水平,降低LP水平,PGC-1表达增加,在一定程度上上调PPARγ的水平,从而促进脂肪组织释放APN,增加APN与Adipo R2结合激活下游的AMPKα、p38、PPARα,下调SREBF1,从而促进脂肪的分解,抑制脂肪的生成,达到减肥的效果。
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