可溶性BAFF在原发性干燥综合征的表达及其致病作用机制的研究

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目的:B细胞激活因子(B-cell activating factor, BAFF)属于肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员,BAFF可以刺激B细胞的存活、增殖和分化,并能够促使其分泌免疫球蛋白。研究发现BAFF异常升高与原发性干燥综合征(primary Sj gren’s syndrome, pSS)、系统性红斑狼疮(systemic lupuserythematosus, SLE)、类风湿关节炎(theumatoid arthritis, RA)等多种自身免疫性疾病的发生、发展有着密切的关系。原发性干燥综合征是一种主要以泪腺及唾液腺等外分泌腺受累,病理上以大量淋巴细胞浸润为特征的全身性自身免疫性疾病。主要表现为口眼干燥,以及多个腺体外器官或系统受累的症状,伴随其血液中存在多种自身抗体及免疫球蛋白的异常增高。近年来许多研究发现pSS患者血清sBAFF水平明显升高,但其在pSS发病中的作用机制尚未完全阐明。本研究测定了pSS患者血清可溶性BAFF,以及Fas和FasL的水平,并进一步分析血清sBAFF与sFas、sFasL临床活动指标的相关性,来探讨细胞凋亡途径在BAFF介导干燥综合征发生、发展中的作用,为临床诊断和治疗方法的探索提供新的思路。方法:1选取河北省人民医院风湿免疫科2011年1月至2011年9月间住院的pSS患者64例;以及同期河北省人民医院体检中心正常健康查体人员20例。研究对象分为两组:①试验组:pSS患者共64例,其中男3例,女61例,平均年龄(51.44±14.72)岁。②对照组:正常健康查体人员共20例,其中男1例,女19例,平均年龄(49.50±17.62)岁。2采集研究对象外周血,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELASA)测定血清sBAFF、sFas和sFasL的水平,间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、免疫印迹法检测抗可提取的核抗原(ENA)抗体,速率散射法检测类风湿因子(RF)、免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)和补体(C3、C4),魏氏法测定红细胞沉降率(ESR),流式法自动血球计数仪检测外周血淋巴细胞计数(Ly)、血红蛋白含量(Hb)以及血小板数计数(PLT)。3pSS疾病活动指数采用欧洲抗风湿病联盟SS疾病活动度指数(ESSDAI)方法进行评估。4应用SPSS13.0统计软件包进行分析处理,计量资料以χ±SD表示,采用t检验做两两比较,多样本均数比较采用方差分析,相关分析采用pearson相关系数检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1pSS患者血清sBAFF、sFas、sFasL表达水平:分别测定各组sBAFF、sFas、sFasL的值。pSS病例组血清sBAFF、sFas与sFasL表达水平分别为(11.44±4.70)ng/ml、(59.53±32.42)pg/ml、(1460.09±928.77)pg/ml,正常健康对照组血清sBAFF、sFas与sFasL表达水平分别为(4.20±0.93)ng/ml、(14.54±5.02)pg/ml、(411.11±129.39)pg/ml。血清sBAFF、sFas与sFasL三者的表达水平在两组之间的差异具有显著的统计学意义(p均<0.001),表明pSS患者血清sBAFF、sFas、sFasL表达水平升高。2血清抗体阳性组和阴性组pSS患者sBAFF、sFas、sFasL表达水平比较:抗体阳性组pSS患者血清sBAFF、sFas与sFasL表达水平分别为(11.40±4.63)ng/ml、(64.44±32.53)pg/ml、(1363.465±869.19)pg/ml,抗体阴性组pSS患者血清sBAFF、sFas与sFasL表达水平分别为(10.66±3.99)ng/ml、(47.00±29.38)pg/ml、(1707.033±1052.19)pg/ml。抗体阳性组和阴性组血清sBAFF、sFas和sFasL表达水平无差异(P均>0.05)。3pSS患者血清sBAFF水平与自身抗体表达的关系:分别比较ANA、RF、抗SSA/SSB抗体阳性和阴性pSS患者血清sBAFF表达水平,发现RF和抗SSA/SSB抗体阳性pSS患者血清sBAFF水平高于抗体阴性者(P<0.05),ANA阳性组和阴性组pSS患者血清sBAFF表达水平无差异(P>0.05)。4pSS患者血清sBAFF水平与各临床指标的相关性:pSS患者血清sBAFF水平与IgG水平呈正相关(r=0.285, P<0.05),与Hb含量和PLT计数呈负相关(r=-0.295,-0.248,P<0.05),与ESR、IgA、IgM、C3和C4水平、Ly计数无相关性(r=0.104,0.056,-0.036,-0.232,-0.190,-0.204,P>0.05);抗体阳性组pSS患者血清sBAFF表达水平与IgG水平呈正相关(r=0.348,P<0.05),与Hb含量和PLT计数呈负相关(r=-0.316,-0.313,P<0.05),与ESR、IgA、IgM、C3和C4水平、Ly计数无相关性(r=0.047,0.115,0.074,-0.286,-0.165,-0.174,P>0.05);抗体阴性组pSS患者血清sBAFF表达水平与ESR、IgG、IgA、IgM、C3和C4水平、Ly计数、Hb含量、PLT计数均无相关性(r=0.114,-0.279,-0.107,-0.393,-0.067,-0.131,-0.239,-0.202,-0.087,P>0.05)。5pSS患者血清sBAFF表达水平与疾病活动指数的关系:pSS患者血清sBAFF表达水平随着ESSDAI指数升高而升高,在疾病活动指数各等级之间差异有统计学意义(各组间P均<0.05)。6pSS患者血清sBAFF表达水平与唇腺病理分级的关系:pSS患者血清sBAFF水平在唇腺病理不同分级各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。7pSS患者血清sBAFF表达水平与sFas、sFasL表达水平相关性分析:pSS患者血清sBAFF表达水平与sFas表达水平呈正相关(r=0.365,P<0.01),与sFasL表达水平无相关性(r=0.045,P>0.05);正常健康对照组血清sBAFF表达水平与sFas、sFasL表达水平均无相关性(r=-0.133,0.026,P>0.05)。结论:1pSS患者血清sBAFF水平较正常对照组明显升高,表明BAFF参与了pSS的发病过程。2RF、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性组pSS患者血清sBAFF表达水平明显高于对应抗体阴性组。提示BAFF在体内自身抗体产生中起着一定的作用。3pSS患者血清sBAFF与ESSDAI评分相关,pSS患者血清sBAFF表达水平与IgG水平呈正相关,与Hb、PLT呈负相关;提示pSS患者血清sBAFF表达水平与疾病活动度以及与pSS临床活动指标密切相关,可作为监测pSS病情活动度的指标之一。4pSS患者血清sBAFF表达水平与唇腺病理分级无相关性,提示血清sBAFF对唾液腺中淋巴细胞的浸润无直接作用。5pSS患者血清sBAFF与sFas均显著升高,且呈正相关,表明抑制细胞凋亡可能是BAFF导致pSS发病的一个重要途径。
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