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目的坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)是新生儿(尤其是早产儿)常见的一种肠道急性炎症性疾病。随着早产儿成活率的不断提高,NEC的发病率也在逐年增加。由于NEC的病因及发病机制的复杂性,目前临床上尚无特异性的防治手段。研究发现,母乳喂养是降低新生儿重症监护病房(NICU)住院期间发生NEC风险的有效方法,但母乳中的哪些成分在发挥作用仍不完全清楚。因此发现更多母乳中有效的生物成分,缩小配方乳与其之间的成分差别,对降低NEC的发病至关重要。乳脂球膜(milk fat globule membrane,MFGM)是母乳中由磷脂、鞘脂及多种蛋白组成的3层膜结构,对于婴幼儿的神经发育、代谢调节及抗炎抗感染均有重要的作用。近几年,MFGM的肠道保护作用得到了越来越多的关注。给予外源性MFGM干预后,能否影响NEC的病程进展,尚未得到证实。本研究的目的是探讨MFGM对新生大鼠NEC模型的干预作用及其潜在的分子机制。方法体内实验以NEC大鼠模型为研究对象,将62只新生两日龄Sprague-Dawley(SD)大鼠(6-7 g,雌雄不限)随机分为4组:正常母乳喂养组(n=12,breastfed normal,BF),配方乳喂养模型组(n=20,formula fed,FF),添加6g/L MFGM配方乳喂养模型组(n=15,FF+6g/L MFGM),添加12g/L MFGM配方乳喂养模型组(n=15,FF+12g/LMFGM)。采用配方乳喂养+缺氧+冷刺激联合作用于新生两日龄SD大鼠,构建NEC模型。记录各组大鼠体重变化及生存情况。收集近回盲部肠管,利用HE染色方法对各组大鼠肠管进行病理学检查及肠损伤评分,并评估各组新生大鼠NEC的发病情况。检测生化指标丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达,评估肠道组织中氧化应激的情况。免疫组化、real-time PCR和Western Blot等方法检测肠粘膜上皮细胞的增殖、凋亡情况、肠粘膜屏障的完整性、肠腔中炎症因子的表达水平以及TLR4在肠壁组织中的表达情况。体外实验,以LPS刺激大鼠肠上皮细胞IEC-6制作的炎症模型为研究对象,通过用不同浓度MFGM预处理细胞后,Western Blot方法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中关键分子的蛋白表达水平。并通过免疫荧光联合Western Blot方法评估NF-κB p65的核转位情况。结果在成功建立新生大鼠NEC模型的基础上,补充了12 g/L MFGM能够维持NEC模型大鼠的体重、提高生存率(P<0.05)、降低发病率(P<0.05)并且可减轻肠管的损伤程度(P<0.01)。而6g/L MFGM的补充对NEC大鼠体重的减轻、生存率及发病率并无显著改善。其次,12 g/L MFGM可下调MDA浓度(FF:7.73±0.36μmol/g vs.FF+12 g/L MFGM:4.47±0.62μmol/g,P<0.01),上调SOD活性(FF:59.32±3.09 U/mg vs.FF+12g/L MFGM:73.41±2.50 U/mg,P<0.01),减少肠上皮细胞凋亡(P<0.01),增加肠上皮细胞增殖(P<0.001),维持了肠粘膜屏障的完整性。此外,12g/L MFGM的添加减少了肠壁组织中TLR4蛋白表达水平及促炎细胞因子的产生。在IEC-6肠细胞中,MFGM的预处理可部分抑制LPS诱导的TLR4,MyD88和p-NF-κBp65蛋白的上调,但对NF-κB总蛋白的表达无影响。此外MFGM还可影响NF-κBp65的核转位情况,从而抑制NF-κB的激活。结论MFGM可通过减轻氧化应激损伤、保持肠黏膜屏障的完整性以及降低炎症反应等,对新生大鼠NEC模型具有一定的保护作用。其抗炎机制可能与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。