猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious Pleuropneumonia，PCP)是当前最常见的呼吸道传染病之一，以急性死亡或呈慢性经过，生长缓慢为临床经过。病理变化上以肺出血性坏死和纤维素性肺炎为主要特征。胸膜肺炎放线杆菌是其病原。分离鉴定病原是确诊疾病和开展病原流行病学的重要前提。在本病原分离方法上，主要依靠采用将病料直接接种TSA培养基或使用选择性培养基提高细菌分离率。然而，由于细菌比较容易失活，导致病料中的活细菌数量相对较少，致使分离的效果不理想。因此，探索一种细菌分离的新方法具有现实意义。也为其它细菌的分离提供借鉴作用。 免疫磁珠技术是近年国内外研究的一种新的免疫学技术，免疫磁珠是免疫微球的一种，它具备了固相化试剂特有的优点以及免疫学反应的高度专一性，并具有分离速度快、效率高和可重复性好；同时操作简单，不需要昂贵的仪器设备。所以它在免疫检测，免疫吸附，细胞分离和培养等领域中得到越来越广泛的应用。 本试验利用表达和纯化胸膜肺炎放线杆菌中保守的外膜蛋白，作为抗原(种特异性非血清型特异性抗原)，免疫家兔制备抗血清，纯化IgG，用此IgG包被免疫微球，确定了包被磁珠所需的IgG浓度和包被时间。建立了利用免疫磁珠技术检测胸膜肺炎放线杆菌的操作流程，所有的14个血清型均能被检测，敏感性高达10.6CFU／ml．用此技术分离送检的20个疑似菌株，分离出10个菌株，并用琼脂扩散试验对每个菌株进行了血清分型。与apxⅣ-PCR检测结果相比，符合率为100％。本方法也能从人工感染猪的肺和扁桃体中回收到病原。最后用本方法检测了从河南，湖北等地送检的病料，成功地分离了5株可疑胸膜肺炎放线杆菌，经apxⅣ-PCR鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。这些结果说明，建立的免疫磁珠技术可以用于胸膜肺炎放线杆菌的分离。