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目的:观察外源性生长抑素类似物乙己苏(Somatostatin,SST)、吉西他滨(Gemcitabine,Gem)单药或联合用药对胰腺癌(pancreatic cancer)PANC-1细胞增殖、迁移的影响,并初步探讨其分子机制。方法:(1)将PANC-1细胞复苏培养后接种于96孔板,培养24h后将各细胞进行随机分组(其中包括空白对照组)。弃上清液,分别在每孔细胞中加入含生长抑素培养液100uL,浓度分别为:0、50、100、200、400、600μg/mL,每种浓度各为5复孔。24h、48h、72h后行MTT法检测。将PANC-1细胞随机分组后予以不同浓度吉西他滨处理(其中包括空白对照组),浓度分别为:0、0.1、1、5、10、20、40、60μmol/L。处理48h后行MTT法检测。依据以上实验得出的SST、Gem半数抑制浓度(IC50)将联合用药进行分组:O组:对照组,S组:SST IC50浓度,G组:Gem IC50浓度,L组:1/2 SST IC50浓度+1/2 Gem IC50浓度。处理48h后行MTT法检测。(2)将PANC-1细胞接种6孔板,培养24h后随机分为对照组和实验组,加入3ml含生长抑素培养液,浓度分别为:0μg/mL(对照组),200μg/mL,400μg/mL,600μg/mL,每种浓度各为3复孔。0h、12h后行划痕实验拍照;再次将PANC-1细胞接种6孔板,培养24h后随机分为对照组和实验组,O组(对照组):不加药物;S组:SST 400μg/mL,G组:Gem 20μmol/L;L组:SST 200μg/mL+Gem 10μmol/L,每孔加入3ml培养液,各为3复孔,0h,12h后行划痕实验拍照。(3)将PANC-1细胞复苏培养后接种6孔板,培养24h贴壁后随机分为对照组及实验组(分组方法同(2)),处理48h后提取细胞总蛋白,采用Western blot免疫印迹分别检测不同浓度生长抑素及与吉西他滨联合作用于胰腺癌细胞48h后E-钙粘附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果:(1)通过MTT实验,各组结果显示不同浓度生长抑素对PANC-1细胞增殖具有一定抑制作用,与浓度和时间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);吉西他滨对PANC-1细胞的增殖抑制作用与浓度呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。生长抑素对PANC-1细胞的IC50为400μg/mL;吉西他滨对PANC-1细胞的IC50为20μmol/L。与对照组及单药组比较生长抑素联合吉西他滨对细胞的抑制作用更强,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)细胞划痕实验发现,浓度越高伤痕愈合指数越小,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组及单药组比较生长抑素联合吉西他滨伤痕愈合指数最小,差异具有统计学意义(P<0.05);(3)免疫印迹分析显示,E-cadherin表达与生长抑素浓度呈正相关,而Vimentin表达与生长抑素浓度呈负相关,差异具有统计学意义(P<0.05);生长抑素和吉西他滨联合用药相比对照组或两药单用时E-cadherin表达最多,Vimentin表达最少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.生长抑素与吉西他滨均能抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖且呈剂量和时间依耐性,联合用药的抑制作用更明显。2.生长抑素与吉西他滨联合用药可减弱PANC-1细胞的迁移能力。3.生长抑素增强吉西他滨对胰腺癌细胞的化疗效果可能与逆转胰腺癌上皮-间质转化有关。