背景自身免疫性甲状腺疾病是最常见的一组器官特异性自身免疫性疾病,其主要是因甲状腺自身抗体产生导致的甲状腺功能损害,主要包括Graves病、桥本甲状腺炎。全球流行病学显示其发病率高,以女性多见,早期没有明显的临床症状,多在合并严重并发症时才被发现。蛋白芯片是研究蛋白质组学的一种新型有力工具,是以基因芯片为背景发展起来的检测蛋白质的高效工具,具有其特殊的优点,如高通量、集成化及微型化等。如蛋白芯片检测细胞因子具有两大特点,一方面作为一种半定量工具,能同时检测同一种样本的多种细胞因子,可分析样本之间的表达情况;另一方面可以研究基因与细胞因子的关系,作为基因芯片的补充。蛋白芯片在常见临床疾病的应用中逐步得到大家认可,如在类风湿性关节炎、肿瘤、心血管疾病等都有相关报道,但自身免疫性甲状腺疾病这方面应用目前报道较少。目的1.利用蛋白芯片对自身免疫性甲状腺疾病患者表达的相关细胞因子进行检测,并通过软件及统计学分析选出差异表达的细胞因子。2.对筛选出的细胞因子,扩大样本后利用ELISA法进行定量检测,进一步行统计学分析获得有统计学意义的细胞因子,并探讨其在自身免疫性甲状腺疾病中的可能作用。方法1.通过蛋白芯片技术,分别对5例自身免疫性甲状腺疾病患者(实验组)和3例健康者(对照组)血清进行高通量细胞因子筛选。2.蛋白芯片筛选出差异性表达细胞因子后,扩大样本64例,其中实验组41例,对照组23例,用ELISA法进行验证实验,对细胞因子表达量进行定量检测。3.根据是否服从正态分布采用t-检验或秩和检验得到两组样本中具有统计学意义的细胞因子。结果1.蛋白芯片技术细胞因子检测:本研究蛋白芯片能同时检测80种细胞因子,筛选出差异性表达的共四种,分别为:肺活化调节趋化因子、胰岛素样生长因子结合蛋白3、血小板生成素和血管内皮生长因子,其中胰岛素样生长因子结合蛋白3下调,其余均为上调。2.ELISA法:扩大样本量,对蛋白芯片筛选出的相关细胞因子进行ELISA法检测实验,并对细胞因子表达相关结果进行统计学分析,结果显示与对照组相比,胰岛素样生长因子结合蛋白3实验组表达较高,p>0.05无统计学意义;肺活化调节趋化因子实验组表达较低,p>0.05无统计学意义;血小板生成素实验组与对照组表达不明显;血管内皮生长因子实验组表达较低,p<0.05,有统计学意义。结论1.运用蛋白芯片检测细胞因子,筛选出四种差异性表达的细胞因子,分别为:肺活化调节趋化因子、胰岛素样生长因子结合蛋白3、血小板生成素、血管内皮生长因子,其中胰岛素样生长因子结合蛋白3下调,其余均上调。后续可扩大样本,并结合相关基因数据库进行生物学信息分析。2.ELISA法进一步验证检测四种差异性因子的表达情况,并进行统计学分析,与对照组相比其中血管内皮生长因子表达下降,并具有统计学意义,提示血管内皮生长因子可能在自身免疫性甲状腺疾病发病机制起重要作用,推测血管内皮生长因子通过多种途径参与自身免疫性甲状腺疾病的发生发展,可能是疾病潜在生物学标志物和预测因子。后续可扩大样本并进一步行q-PCR检测探索其具体作用机制。