抗牛支原体及巴氏杆菌性肺炎二联卵黄抗体的制备及应用效果研究

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由牛支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染引起的犊牛肺炎和关节炎,可导致大量犊牛的死亡及严重的经济损失。因国内尚无理想的疫苗对其进行有效的预防,抗菌药物易产生耐药性及效果不稳定。本研究旨在制备抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌的卵黄抗体并进行临床应用观察,为本病提供新的防治方法。研究结果如下:1、抗牛支原体高免卵黄抗体的制备:首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫蛋鸡,剂量为0.5mg/只,首免后第15、30、45d采用弗氏不完全佐剂灭活苗进行加强免疫,剂量分别为1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通过间接ELISA的方法检测卵黄抗体效价,结果表明:在首免后第15d卵黄抗体效价不断增高,免疫后第60d达到高峰,效价为1:128000,并维持30d以上效价开始下降。2、抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体的制备:首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫蛋鸡,剂量为15亿/只,首免后第10、20、30d采用弗氏不完全佐剂灭活苗加强免疫,剂量为30亿/只。采用已建立的IHA方法检测卵黄抗体效价,结果表明:在首免后第3周出现抗体并且效价不断增高,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1:1024,持续5周开始下降。3、抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联IgY的制备:通过对水稀释法、氯仿法和卡拉胶法三种提取IgY方法的比较,结果表明:采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,操作简便、时间短、IgY得率较高,可作为卵黄抗体IgY的首选提取方法;无菌检测及动物安全性实验表明制备的IgY安全可靠。4、高免二联卵黄抗体的临床应用与观察:通过灌服不同剂量的卵黄抗体及肌肉注射不同剂量IgY,对犊牛进行预防和治疗,结果表明:最佳的预防量为灌服二联卵黄抗体20mL/头,肌注IgY3mL/头;最佳的治疗量为灌服二联卵黄抗体40mL/头,肌注IgY4mL/头,如果配合使用氟苯尼考和泰乐菌素其治愈率可达80%以上。
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