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丹参多酚酸为临床中用于治疗脑中风类疾病的有效药物,拥有良好的治疗效果且不良反应少,但是由于丹参多酚酸主要为水溶性成分,口服给药生物利用度极低、代谢迅速,因此目前只有注射剂品种在临床使用。注射给药给患者带来了很多不便,如不能在家中给药且滴注时间长,给患者增加了额外的病痛。同时,中药注射剂输液引起的药物不良事件目前仍使其在临床中的应用存在很大的安全隐患。因此,本论文制备一种可供口服的丹参多酚酸制剂,即丹参多酚酸复乳滴丸,并对其制备工艺、质量标准、口服生物利用度、药效学及对内皮细胞的保护作用机制进行了系统的研究,希望为发展、开发丹参多酚酸这种丹参的有效成分提供理论及实践依据。全文主要研究内容摘要如下:（1）丹参多酚酸W/O/W型复乳制备工艺的优化本部分首先进行丹参多酚酸复乳的处方前研究,主要考察了丹参多酚酸中主要成分丹酚酸B的体外含量测定、复乳包埋率及离心保留率的检测方法。建立了高效液相色谱法（HPLC）测定复乳中丹酚酸B的含量,经过方法学考察验证了该检测方法选择性好,在0.3170.98μg/mL范围内呈良好的线性,加样回收率、精密度等均符合要求,测得丹参多酚酸中丹酚酸B的含量为40.00%,为含量最高的一种成分。本课题采用高速离心法测定丹参多酚酸复乳的包埋率和离心保留率,该方法精密度良好。采用单因素考察和L9（34）正交试验法,以包埋率和离心保留率的综合评分为考察指标,优选W/O/W型复乳的最佳制备工艺。丹参多酚酸W/O/W型复乳的最佳制备工艺为:丹参多酚酸占内水相12%,亲脂性乳化剂选定为脱水山梨醇脂肪酸酯80（Span80）,HLB值为4.3,用量为油相的20%,油水质量比为1:0.8,初乳与外水相的质量比例为1:1,亲水性乳化剂为Span 80混合聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯80（Tween 80）,HLB值为8.1,亲水性乳化剂用量为外水相的10%。验证试验表明该制备工艺能够得到平均包埋率为81.73%和平均离心保留率为83.37%的复乳。（2）丹参多酚酸W/O/W型复乳的质量评价将正交试验优化的最佳处方进行放大,自制三批丹参多酚酸W/O/W型复乳样品,对物理性质如形态、粒径大小等进行考察,采用高速离心法测定丹参多酚酸W/O/W型复乳的包埋率和离心保留率,并对稳定性进行研究。结果表明,复乳为类白色至淡黄色均匀乳液,无特殊气味,中粒径为0.622μm,跨距PDI为0.279,粒径分布较集中,丹参多酚酸W/O/W型复乳中丹酚酸B平均含量能够达到233.51 mg/g,RSD为1.11%。释放度考察表明12小时可释放丹酚酸B药物总量的90.56%,释放速率明显比原料药缓慢。经过六个月的稳定性加速试验验证丹参多酚酸W/O/W型复乳的稳定性良好,丹酚酸B的含量、形态、包埋率和离心保留率均较稳定。（3）丹参多酚酸复乳滴丸的制备工艺采用单因素考察和L9（34）正交试验法,以滴丸的外观质量、溶散时限、丸重变异系数的综合评分为考察指标,优选丹参多酚酸W/O/W型复乳滴丸的最佳制备工艺。最佳制备工艺为选用PEG6000为基质,药物与基质比为1:6,甲基硅油为冷凝剂,熔融温度为70℃,滴距为5 cm,验证试验表明该工艺综合评分为66.12,RSD为0.86%,为最佳制备工艺。（4）丹参多酚酸复乳滴丸质量评价将优选的丹参多酚酸复乳滴丸制备工艺进行放大试验,对自制的三批丹参多酚酸复乳滴丸样品进行质量评价,三批丹参多酚酸W/O/W型复乳滴丸为黄色丸状,表面光泽,无特殊气味,平均溶散时限为3.07 min,丸重变异系数为2.68%,重量差异符合药典要求,滴丸主要成分丹酚酸B平均含量为0.06 mg/粒,稳定性加速试验表明滴丸经过6个月性质稳定、可靠,成型工艺合理、可行。最后按照《中国药典》相关规定制定了丹参多酚酸复乳滴丸质量标准,为进一步开发该制剂提供了良好的基础。（5）生物利用度及初步药效学考察建立了LC-MS/MS检测大鼠血浆中丹酚酸B含量的测定方法,该方法具有检测快速、检测限低、定量准确的优点。本方法的前处理方法简便,采用甲醇沉淀蛋白后离心取上清经微孔滤膜滤过后进样即可,所得回收率较高,符合检测要求。对检测方法的方法学进行考察,方法具有良好的线性关系、测定精密度和回收率,RSD值均小于15%。对样品的冻融稳定性进行考察结果RSD值同样小于15%,稳定性良好。以丹酚酸B的给药剂量20 mg/kg计算,设原料药静脉注射、原料药口服、丹参多酚酸W/O/W型复乳口服和丹参多酚酸复乳滴丸口服组,考察口服生物利用度。结果显示,口服丹参多酚酸原料药组丹酚酸B口服生物利用度仅为0.8%,而复乳制剂中丹酚酸B的口服生物利用度升高为19.48%,复乳滴丸中丹酚酸B的口服生物利用度为22.44%,均比口服原料药组有明显的提高,且复乳组和复乳滴丸组的t1/2和MRT0-∞也明显延长。建立大鼠急性血瘀模型,评价丹参多酚酸复乳滴丸与丹参多酚酸注射给药对急性血瘀模型大鼠凝血功能及血液流变学的影响,初步评价药效。结果显示,丹参多酚酸复乳和复乳滴丸能够明显降低急性血瘀模型大鼠不同切变率下的全血黏度,并可以明显延长凝血时间（PT）、凝血活酶时间（APTT）而起到改善凝血功能的作用,其作用与丹参多酚酸静脉给药效果相当。以上研究结果表明,丹参多酚酸复乳滴丸具有良好的活血化瘀作用,具体表现为改善血液黏度、血凝功能等。（6）丹参多酚酸对高糖诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的保护机制建立高糖诱导的HUVEC细胞损伤模型,探究丹参多酚酸对高糖诱导的HUVEC细胞损伤的保护作用及机制。实验结果表明:丹参多酚酸预给药后可以显著逆转高糖诱导的HUVEC细胞的凋亡,提高细胞存活率。同时预给药丹参多酚酸可以显著提高HUVEC细胞中一氧化氮（NO）的水平,降低活性氧（ROS）水平,并抑制HUVEC细胞中凋亡蛋白半胱天冬酶-3/9（Caspase-3/9）的剪切活化,使B细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）的蛋白表达上调、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达下调,从而逆转高糖诱导的HUVEC细胞凋亡。对具体的作用机制进行研究发现,丹参多酚酸预给药可以显著上调HUVEC细胞中沉默信息调节因子2相关酶类1（Sirt 1）和内皮细胞的一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达,表明丹参多酚酸可通过Sirt 1-eNOS途径保护高糖诱导的HUVEC细胞损伤。