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很多迹象表明链霉菌FR-008与灰色链霉菌IMRU3570有着十分密切的关系,它们均能产生一种抗真菌的七烯大环内酯类抗生素。本文主要从化学和生物学两个角度分析和比较了这两个菌株的异同,并对抗生素的氨基海藻糖残基基因进行了克隆尝试。 首先从大量的发酵液中提取分离了链霉菌FR-008产生的抗生素FR-008,并通过大孔树脂吸附、柱层析等手段进行了初步提纯。HPLC分析研究表明,它与灰色链霉菌IMRU3570产生的杀假丝菌素是同一种物质,均含有相同的几种主要组分。利用HPLC进一步分离提纯,获得了FR-008的4个主要组分FR-008 a,b,c,d。对这4个组分进行生物活性测试分析后发现,它们对啤酒酵母的抑制活性无显著差异。在结构分析方面,通过核磁共振技术(500兆赫),1H-1H NMR,13C NMR,对FR-008 b组分进行了结构分析,结果表明它与杀假丝菌素D是同一种化合物;另外通过对FR-008 b和FR-008 a的1H NMR的比较,提出了FR-008 a的可能结构。 对链霉菌FR-008和灰色链霉菌IMRU3570的RFLP分析发现,它们的染色体具有很高同源性;PFGE的比较研究发现,这两个菌株的明显区别是链霉菌FR-008携带有两个线性质粒,而在灰色链霉菌IMRU3570中则没有这两个线性质粒。这两个菌株染色体的VspI酶切图谱无明显差异。因此可以推测,这两个菌株在表型上的差别有可能与链霉菌FR-008中的线性质粒有直接的关系,但也不能排除染色体基因之间的差异。 利用与糖基合成有关的基因str-DE作探针对这两个菌株的总DNA进行了Southern杂交,从两个菌株的总DNA中均检测到一段相同大小的阳性片断,约6.4kd(BamHI+BglII酶切)。用这个探针,对链霉菌FR-008的基因文库进行杂交筛选,获得了3个阳性克隆,经Southern杂交分析,发现它们均含有6.4kb共同的阳性片断。由于在杂交实验中使用的是异源探针,又未用克隆的片断进行基因中断或基因置换试验,因而目前尚不能确定所克隆的糖基基因与FR-008的氨基海藻糖残基的生物合成有关。