蒿甲醚对白血病细胞作用体外实验研究

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目的:探讨蒿甲醚对人慢性髓性白血病细胞K562、小鼠白血病细胞株L615体外增殖的影响及作用机制;研究蒿甲醚抑制白血病细胞促进内皮细胞增殖、迁移的作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(简称MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对人慢性髓性白血病细胞株K562、小鼠白血病细胞株L615、人脐静脉细胞株HUV-EC、小鼠胰岛血管内皮细胞株MS1生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测药物对K562细胞和L615细胞细胞周期的影响,TUNEL法检测药物诱导K562细胞和L615细胞凋亡的情况;RT-PCR法和ELISA法检测蒿甲醚抑制K562细胞和L615细胞VEGF的表达;内皮细胞增殖试验和内皮细胞迁移试验检测经蒿甲醚作用后的K562细胞和L615细胞条件培养基对内皮细胞增殖和迁移的影响。结果:蒿甲醚可以抑制人慢性髓性白血病细胞株K562细胞、小鼠白血病细胞株L615增殖,其抑制作用呈剂量和时间依赖性。经蒿甲醚作用K562细胞24h、48h、72h后的IC50值分别为32.27±0.15μg/ml、27.48±0.08μg/ml、25.00±0.37μg/ml;作用L615细胞24h、48h、72h后的IC50值分别为38.07±0.39μg/ml、27.11±0.71μg/ml、25.84±0.32μg/ml;流式细胞术细胞周期分析结果显示蒿甲醚可以将K562细胞和L615细胞阻滞在细胞周期G2/M期,G0/G1期细胞减少。流式细胞术TUNEL法结果显示蒿甲醚作用后K562细胞和L615细胞凋亡率高于对照;RT-PCR检测蒿甲醚作用后的K562细胞和L615细胞VEGF mRNA表达下降;ELISA法检测蒿甲醚预处理的条件培养基VEGF表达减少;内皮细胞增殖试验和内皮细胞迁移试验结果显示内皮细胞在蒿甲醚预处理的条件培养基中细胞增殖率和迁移率均低于对照。结论:蒿甲醚可以抑制人慢性髓性白血病细胞株K562细胞、小鼠白血病细胞株L615增殖,诱导肿瘤细胞的凋亡;蒿甲醚可以抑制白血病细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)。
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