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目的：本课题旨在揭示C333H药代动力学特性并配合新药注册,获得基本的动力学参数并阐明动态变化规律,为该药的进一步研究提供资料。 方法：(1)建立了以乙腈沉淀蛋白为前处理方式,使用LC-MS法检测生物样品中C333H浓度的检测方法,并对该方法进行了线性、特异性、灵敏度、精密度、回收率、基质效应和稳定性的方法学考察;(2)大鼠和比格犬口服低、中、高(大鼠:2、6、18mg/kg,比格犬:2、5、12.5mg/kg)三个剂量的C333H,在不同时间点(大鼠低剂量:0min、5min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h,中剂量和高剂量:3min、8min、15min、25min、40min、1h、2h、4h、6h、8h、12h、24h;比格犬:8min、15min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h)大鼠由眼眶静脉采血,比格犬后肢静脉采血,测定血药浓度并求算药代动力学参数,揭示C333H在大鼠和比格犬体内的药代动力学消除速率特点;(3)雌雄大鼠和雌雄比格犬分别口服6mg/kg和5mg/kg的C333H,测定血药浓度求算药代动力学参数,用Origin6.0软件对药代动力学参数进行t检验,考察C333H在大鼠和比格犬体内药代动力学的性别差异。(4)大鼠静脉注射2mg/kg剂量,比格犬静脉注射1mg/kg剂量,分别求算C333H在大鼠和比格犬体内的绝对生物利用度;(5)比格犬连续口服5mg/kgC333H(1次/12h,连续5天)考察有没有体内蓄积。(6)大鼠口服6mg/kg剂量的C333H,在给药后10min、40min、8h和36h测定C333H在大鼠主要组织(血、脑、心、肝、脾、肺、肾、肠、肠内容物、胃、胰腺、肌肉、子宫、卵巢、睾丸和脂肪)中的浓度,揭示C333H在大鼠组织中的分布特点。(7)大鼠口服6mg/kgC333H,研究原型药物经尿、粪便和胆汁的排泄情况,考察C333H在大鼠体内的物料平衡。(8)应用平衡透析法测定C333H在大鼠、比格犬和人血浆中的蛋白结合率。 结果：(1)大鼠血浆C333H浓度在25～20000ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系,R2=0.99629,定量下限为25ng·mL-1。低、中、高浓度的批内、批间精密度分别为3.5％、2.8%、3.0%和6.6%、9.2%、3.3%,准确度分别为100.3%±3.5、108.7±3.1%和110.7±3.4%,回收率分别为98.5±5.1%、101.7±5.4%和99.1±5.3%,基质效应分别为82.9±4.8%、94.6±6.6%和102.0±5.3%。(2)比格犬血浆C333H浓度在10～4000ng·mL-1范围内呈现良好的线性关系,R2=0.99562,定量下限为10ng·mL-1。低、中、高浓度的批内、批间精密度分别为4.0%、2.0%、2.7%和3.7%、3.0%、5.0%,准确度分别为92.2±3.7%、101.4±2.0%和108.7±2.9%,回收率分别为96.6±1.7%、95.0±1.5%和99.7±1.2%,基质效应分别为106.8±1.8%、110.4±1.8%和119.0±1.5%。(3)大鼠单次口服低、中、高三个剂量(2、6、18mg/kg)的C333H后,Tmax分别为0.4±0.1h、1.7±2.4h和0.9±0.2h,t1/2z分别为5.2±1.9h、8.3±4.2h和5.3±3.2h,MRT(0-t)分别为4.8±0.9h、6.5±3.3h和5.5±1.3h,CLz/F分别为1.5±0.4L/h/kg、1.2±0.5L/h/kg和0.9±0.4L/h/kg,Vz/F分别为11.3±5.4L/kg、18.1±8.2L/kg和6.2±3.4L/kg。AUC和Cmax值与给药剂量的关系为:AUC比值为1:2.8:17.2;Cmax比值为1:2.8:15.9,均随给药剂量增加而呈现非线性增加的特点。(4)比格犬单次口服低、中、高三个剂量(2、5、12.5mg/kg)的C333H后,Tmax分别为0.6±0.1h、0.5±0.2h和0.6±0.1h,t1/2z分别为1.6±0.6h、3.5±4.3h和1.3±0.4h,MRT(0-t)分别为1.7±0.2h、2.3±1.4h和1.9±0.8h,CLz/F分别为1.8±0.7L/h/kg、2.0±0.8L/h/kg和2.6±1.4L/h/kg,Vz/F分别为3.8±1.2L/kg、8.8±8.2L/kg和5.4±4.4L/kg。AUC和Cmax值与给药剂量的关系为:AUC比值为1:2.4:4.6;Cmax比值为1:2.4:6.7,主要表现为2-12.5mg/kg剂量给药范围内AUC和Cmax随给药剂量增加而成比例增加,呈现线性药物代谢的特点。(5)雄性大鼠口服2mg/kgC333H后的绝对生物利用度为19.6%。比格犬静注1mg/kg剂量,求得低、中、高三个剂量的绝对生物利用度分别为26.7%、26.6%和21.1%。(6)比格犬经连续口服5mg/kg的C333H(一次/12h,连续5天)后,AUC末次/AUC首次为0.92,药物在体内未出现蓄积现象。(7)大鼠的药动学性质具有明显的性别差异,大鼠口服6mg/kgC333H后,药代动力学参数AUC(0-t)、AUC(0-∞)、CLz/F、Vz/F、Cmax均有显著性差异(P<0.05)。雌性大鼠体内药物的暴露量明显高于雄性大鼠。(8)雌雄比格犬口服中剂量(5mg/kg)的C333H后,MRT♀为1-7h,MRT♂为1-5h,其余参数没有差异,雌性比格犬对药物的消除比雄性稍弱,性别差异不明显。(9)大鼠口服6mg/kg的C333H后,药物原型在组织分布广泛,达峰时间在0.5-2h之间。胃、肠、肝含量最高,在心、肺、肾等血流丰富的组织中较高,在脑组织、脂肪、生殖器中含量较低,36h后各组织中均没有蓄积现象。(10大鼠口服C333H6mg/kg后原型药物主要经粪便排泄(120h内累积排泄率为47.34%),尿中无原型药物排泄,尿和粪便的累积排泄总量达47.34%,原型药物经胆汁排泄量为(72h内)为30.45%。(11)低、中、高三个浓度(500、1500和4500ng/ml)的C333H与人血浆蛋白结合率分别为99.2±0.3%、99.7±0.1%和99.9±0.0%,低、中、高三个浓度(600、1800和5400ng/ml)的C333H与大鼠血浆蛋白结合率分别为99.4±0.2%、99.8±0.0%和99.9±0.0%,与比格犬血浆蛋白结合率分别为99.5±0.2%、99.9±0.0%和99.9±0.0%。(12)对C333H起主要代谢作用的酶是CYP3A4。