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由同源盒基因Nkx6.2编码产生的同源结构域Nkx6.2作为一种反式作用因子,在少突胶质细胞特化、成熟及髓鞘形成过程中和中枢神经系统(central nervous system,CNS)胚胎期神经母细胞特化生,都发挥重要的调控作用。本实验室在前期研究过程中发现,脑发育时期甲状腺激素(thyroid hormone, TH)不足会造成CNS内重要神经细胞异常,同时伴随Nkx6.2低表达。但是,由于TH不足导致的脑发育迟滞的病理过程中,转录因子Nkx6.2参与的具体机制尚不明确。我们希望通过给予甲状腺功能减低模型添加外源性Nkx6.2的方法,可以有助于解决或部分解决这一问题。本课题组前期工作将Nkx6.2与核定位信号(nuclear location sequence, NLS)、TAT蛋白转导域(protein transduction domain, PTD)一起构建重组表达质粒pET-28a-TN-NKx6.2。本文将该重组表达质粒pET-28a-TN-NKx6.2转染神经细胞并表达,细胞荧光免疫确定其表达产物可以进入神经细胞细胞核。之后对实验室前期获得的纯化TAT-NLS-Nkx6.2融合蛋白,进行荧光染料Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯(Cy7-N-hydroxysuccinimide ester, Cy7NHS)的标记。随后向小鼠尾静脉注射Cy7-TN-Nkx6.2,应用活体荧光成像系统监测融合蛋白TN-Nkx6.2在小鼠脑部的动态分布,结果证明该融合蛋白能够通过血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)进而到达脑组织；同时通过免疫荧光组化实验表明该融合蛋白可以内化进入神经细胞胞浆、胞核。最后向神经干细胞中加入融合蛋白TN-Nkx6.2继续培养,细胞荧光免疫反应观察不同培养不同时间段神经细胞分化情况,发现融合蛋白TN-Nkx6.2可以促进神经干细胞的分化,尤其是促进神经干细胞向少突胶质细胞特化,促进神经干细胞的成熟。