胃癌是常见的消化道恶性肿瘤,外科手术长期以来被认为是治疗胃癌最有效的手段,有无淋巴结转移是影响胃癌患者术后生存的关键因素之一。以D2根治术为代表的胃癌根治性手术对胃周淋巴结清扫提出了较高的要求。纳米活性炭是目前临床常用的淋巴结示踪显影剂之一,呈黑色,具有良好的淋巴靶向性,可有效地帮助淋巴结清扫。即使对于经验丰富的外科医师,使用纳米活性炭进行淋巴示踪可提高胃癌前哨淋巴结的检出率(Sentinel Lymph Node Biopsy, SLNB),避免过度的淋巴结清扫,缩短手术时间,降低术后并发症的发生率。纳米活性炭还是一种良好的化疗药物载体,它可能使药物以最小的活性及剂量损失穿过体内各种生物屏障到达靶组织,选择性地杀伤靶组织内的肿瘤细胞,避开血液、骨髓内的正常细胞,减轻全身毒副反应。纳米活性炭吸附化疗药物通过适当的给药途径进入毛细淋巴管后,不仅可以黑染淋巴结,它所吸附的药物还可在淋巴结内缓慢释放,起到药物性淋巴结清扫作用。目前已获得药监局批准进入临床的纳米活性炭制剂商品名为卡纳琳(Carbon Nanoparticle Suspension, CNS)。本课题研究了卡纳琳在胃癌治疗中的应用价值,包括以下五个章节的内容。第一章卡纳琳-紫杉醇混悬液的制备及其性质研究研究目的：寻找一种新的可被卡纳琳有效吸附的化疗药物,测定其吸附率材料和方法：分别使用了奥沙利铂、紫杉醇与卡纳琳进行物理吸附,在重庆莱美药业股份有限公司的帮助下,应用新型超滤膜过滤,高效液相色谱法测定卡纳琳对化疗药物的饱和吸附量。结果：由于草酸铂遇氯离子降解,卡纳琳混悬液无法对奥沙利铂进行稳定吸附；卡纳琳对紫杉醇吸附良好,其饱和吸附率为1m1(卡纳琳)：7mg(紫杉醇),已申报国家专利。结论：卡纳琳-紫杉醇混悬液(CNPS)吸附率高,性状稳定,1ml卡纳琳可饱和吸附7mg紫杉醇。第二章CNPS大鼠胃浆膜下注射的安全性研究研究目的：研究CNPS大鼠胃浆膜下注射后行胃大部切除术的安全性。材料和方法：以SPF级Wistar大鼠为模型,随机分为实验组与对照组,每组10只。实验组胃浆膜下取2点注射CNPSO.5ml后行胃大部切除术。对照组胃浆膜下取2点注射生理盐水0.5m1后行胃大部切除术。观察术后7天内的死亡率及不良反应发生情况。结果：实验组1只死于术后呼吸衰竭,1只死于吻合口瘘；存活鼠中7只有术后腹腔粘连。对照组1只死于术后呼吸衰竭,1只死于吻合口瘘,1只死于腹腔内活动性出血,存活鼠中6只有术后腹腔粘连。结论：CNPS术中胃浆膜下注射十分安全,术后死亡率、腹腔粘连发生率与对照组相比无明显统计学差异。第三章卡纳琳淋巴示踪效果观察及方法改进研究目的：观察卡纳琳术中胃浆膜下注射的淋巴示踪效果,并改进示踪方法材料和方法：先以猪为动物模型,使用CNPS术中胃浆膜下注射示踪,观察淋巴结显影效果。分析其效果不理想的原因后,选取了2例临床分期不同的胃癌患者使用单纯卡纳琳术中胃浆膜下示踪并观察,再以Wistar大鼠为动物模型,进一步验证卡纳琳胃浆膜下示踪的效果。最后,以Wistar大鼠为动物模型随机分为4组,分别予卡纳琳腹腔注射后1天,3天,7天以及胃浆膜下注射后30分钟观察并比较其淋巴示踪效果。结果：CNPS猪浆膜下注射30min后仅胃大弯侧淋巴结显影。早期胃癌患者胃浆膜下注射卡纳琳30min左右仅见幽门下一枚淋巴结显影,进展期胃癌患者未见任何淋巴结显影。大鼠胃浆膜下注射卡纳琳淋巴示踪效果亦不满意,以大弯侧淋巴结显影为主。腹腔注射卡纳琳3-7天后淋巴示踪效果更佳,以7天后污染最轻,效果最佳。结论：胃浆膜下注射卡纳琳淋巴示踪效果欠佳,大鼠腹腔注射卡纳琳3-7天后可获得更佳的淋巴示踪效果,以7天后污染最轻,效果最好。第四章SPF级荷瘤鼠建模探讨研究目的：建立SPF级淋巴结转移瘤荷瘤鼠模型方法：选取了EL-4淋巴瘤细胞株进行C57BL小鼠腹腔注射,观察成瘤及腹腔淋巴结转移情况。选取了CT-26结肠癌细胞株进行BALBC小鼠足垫注射,观察成瘤及下肢、腹股沟淋巴结转移情况。选取了WALKER-256腹水癌细胞株进行wistar大鼠皮下注射成瘤+胃浆膜下原位移植,观察胃部成瘤及胃周淋巴结转移情况。结果：EL-4细胞株在腹腔注射后1-2周腹腔成瘤明显,直至注射后一月未见淋巴结转移。CT26细胞株足垫注射后一周局部成瘤明显,但直至注射后2月,未见淋巴结转移。WALKER-256细胞株局部注射1周后成瘤明显,瘤组织块原位移植至胃浆膜下生长至大鼠12周龄时停止生长。结论：EL-4细胞株腹腔注射,CT-26细胞株足垫注射,WALKER256细胞株皮下注射成瘤后行胃浆膜下原位移植均无法形成淋巴结转移瘤模型。第五章CNPS腹腔化疗的药代动力学研究研究目的：研究CNPS腹腔化疗的药代动力学。材料和方法：将Wistar大鼠随机分为实验组与对照组,分别腹腔注射卡纳琳-紫杉醇混悬液(CNPS)及单纯紫杉醇溶液,给药后7天内的不同时间点取各组大鼠血液、肠系膜淋巴结及腹腔洗液样本,采用高效液相-二级质谱联用法检测紫杉醇浓度进行分析。结果：实验组血浆AUC为对照组的0.6263倍；淋巴结AUC为对照组的0.7495倍；腹水AUC为对照组的1.25倍。实验组血浆药物代谢半衰期(t1/2)为对照组的1.607倍；腹水t1/2为对照组的0.879倍；淋巴结t1/2为对照组的1.097倍。结论：卡纳琳-紫杉醇混悬剂行腹腔化疗具有血药浓度低、腹腔药物浓度高、安全性高的特点,但淋巴靶向性及淋巴组织滞留作用不明显,其机制有待进一步研究。