花生青枯病生防菌筛选及花生品种抗性测定

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在中国影响花生产量的主要病害为花生青枯病,该病害在我国长江流域及以华南的花生产区发生较为严重。花生青枯病的发生面积大约占花生种植总面积的1/10,对花生产量造成极大的损失。目前,花生青枯病的生物防治正成为植保工作者的研究热点。本研究进行了花生青枯病生防细菌的筛选和花生品种抗性测定研究,具体结果如下:1、花生青枯病拮抗细菌筛选:从作物根际土壤中分离获得细菌380余株,将这些菌在平板上进行了拮抗青枯病菌的试验,筛选出对花生青枯病菌菌抑菌效果较好的拮抗菌3株Ab、A27和A38,抑菌圈直径分别为9.5mm、10.5mm和15.0mm。2、拮抗菌株的鉴定:(1)拮抗菌株A27的鉴定。利用细菌通用引物27F/1492R对拮抗菌A27的16S r RNA基因进行PCR扩增,获得大小为1386bp产物,并与GenBank上序列进行比对,结果显示,与菌株A27 16S r DNA序列相似性100%的细菌只有Pseudomonas aeruginosa;再参考伯杰氏系统鉴定手册(第二版),选取19项生理生化性状稳定的指标进行测定,结果显示,菌株A27与P.aeruginosa的生理生化性状相似性达89.47%,因此,初步将菌株A27鉴定为绿脓假单胞杆菌(P.aeruginosa)。(2)拮抗菌株A38的鉴定。利用细菌通用引物27F/1492R对拮抗菌A38的16S r RNA基因进行PCR扩增,获得大小为1435bp产物,并与GenBank上序列进行比对,结果显示,与菌株A38 16S r DNA序列相似性99%的细菌只有Pseudomonas aeruginosa。再参考伯杰氏系统鉴定手册(第二版),选取19项生理生化性状稳定的指标进行测定,结果显示,菌株A38与P.aeruginosa的生理生化性状相似性达78.95%,因此,初步将菌株A38鉴定为绿脓假单胞杆菌(P.aeruginosa)。(3)拮抗菌株Ab的鉴定。利用细菌通用引物27F/1492R对拮抗菌Ab的16S rRNA基因进行PCR扩增,获得大小为1401bp产物,并与GenBank上序列进行比对,结果显示,与菌株Ab 16S r DNA序列相似性99%的细菌有Bacillus velezensis、Bacillus subtilis、Bacillus polyfementicus、Bacillus amyloliquefaciens和Bacillus siamensis 5种细菌。再参考伯杰氏系统鉴定手册(第二版),选取21项生理生化性状稳定的指标进行测定,结果显示,菌株Ab与B.siamensis的生理生化性状相似性达95.24%,因此,初步将菌株Ab鉴定为暹罗芽孢杆菌(B.siamensis)。3、拮抗菌株对花生青枯病的盆栽防治效果:在花生盆栽试验中,分别接种Ab、A27和A38菌株2d后再接种青枯病菌,结果显示,3个菌株的防治效果分别为12.16%、25.66%和52.71%,其中拮抗菌株A38的防效显著高于其他两个菌株。4、花生对青枯病的抗性鉴定:经人工接种,对80个花生品种进行青枯病抗性测定,结果显示,80个测试品种中,其中表现为高度抗病的花生品种(Q506)有1个,占供试花生品种的1.25%;中度抗病的花生品种有34个,其占供试花生品种的42.5%,其中花生品种S48发病率为11.25%,接近于高抗,其抗病性显著高于其他中抗品种;中度感病的花生品种有30个,占供试花生品种的37.5%;为高度感病的花生品种有17个,占供试品种的21.25%。
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