【摘 要】
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神经坏死病毒(NNV)可感染多种重要鱼类,对全球鱼类养殖业造成了巨大的经济损失。谷氨酸胺是三羧酸循环途径中一个重要的成分,并且己经被病毒利用用来进行高效复制。然而,人们
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神经坏死病毒(NNV)可感染多种重要鱼类,对全球鱼类养殖业造成了巨大的经济损失。谷氨酸胺是三羧酸循环途径中一个重要的成分,并且己经被病毒利用用来进行高效复制。然而,人们对NNV的复制和谷氨酰胺之间的关系了解很少。本论文采用赤点石斑鱼神经坏死病毒(RGNNV)感染石斑鱼鳍条(GF-1)和条纹月鳢细胞(SSN-1),研究了谷氨酰胺对RGNNV复制的影响。用焚光定量方法检测病毒mRNA的表达,用Western blotting方法检测病毒的蛋白表达。得出了以下主要结果:缺乏谷氨酰胺对细胞活性几乎没有影响,但显著限制RGNNV的复制。此外,添加丙酮酸,草酰乙酸(OAA),和二甲基α-酮戊二酸(a-KG)后,RGNNV的复制有一定程度的恢复。此外,添加谷氨酰胺酶抑制剂BPTES后可以抑制病毒复制;然而,当添加a-KG后,RGNNV病毒的复制也可部分恢复。我们在mRNA的转录水平检测了不同时间点病毒RNA聚合酶基因和衣壳蛋白基因mRNA的变化,发现在使用缺乏谷氨酰胺时,病毒复制都受到显著抑制。综上所述,这些研究结果表明谷氨酰胺可以通过三羧酸循环调节RGNNV复制,对RGNNV的复制是必要的。这些结果可以为研发抗RGNNV感染提供新的途径。
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