背景：在临床上，成瘾物质大致可分为三类：阿片类(如Heroin，Morphine)、精神刺激类(如Cocaine)和酒精(Ethanol)。酒精作为最易获得的成瘾物质，以惊人的消耗量流传于全人类，酒精中毒、酒精滥用已经成为世界各国较为普遍的社会问题。有研究提示酒精滥用、酒精依赖不仅与暴力犯罪、交通事故、高离婚率等社会现象有明显相关，而且酒滥用、酒精中毒导致的心理、躯体上的疾病亦成为仅次于心血管疾病、肿瘤，居于第三位的医学问题。因此，研究酒精依赖的分子生物学机制具有重要的医学和社会学意义。 众所周知，酒精与阿片及精神兴奋药如可卡因、苯丙胺等有相似的作用，如使人产生欣快感、出现耐受和依赖以及长期服用后停止饮酒有某些戒断反应。连续大量饮酒会使机体在生理及行为方面对酒产生依赖性，同时引致机体多器官系统的病理改变。依赖性的产生与生理耐受性的形成有关，而身体依赖性一旦形成，个体就会表现出对酒的渴求和经常需要饮酒，以避免戒断综合征的折磨以及其它不良体验。因此，酒依赖的这种核心特征就是对酒的强烈渴求，即失去控制地寻酒和饮酒行为。尽管三类成瘾物质具有不同的分子结构，在中枢的起始作用和受体系统选择性有所不同，但它们产生强化和奖赏效应的中枢神经通路大致相同，主要神经结构是中脑-边缘多巴胺奖赏系统，其中中脑被盖区(ventral tegument area，VTA)-腹侧纹状体(伏核，nucleus accumbens，NAcc)-额叶皮层(frontal cortex)是成瘾性药物引起奖赏效应的最后公共通路，成为研究酒精成瘾的重要脑区。 南京医科大学博士学位论文 对于成臆物质造成身体依赖及其机制的研究已有长足的进展；且已有比较有效的治疗方法，而对于成痛物质造成强烈药物渴求及脱痛后的高度复吸率问题，至今尚无理想的解决办法，因而成为临床上预防和治疗物质成痕的关键。有理论认为，此种神经生理功能紊乱反映了慢性用药所导致的信号转导功能及神经细胞基困表达方面适应性改变，这些改变引起了神经元活性的改变及神经环路的变化，最终导致动物行为的改变厂’“’。来自阿片类药物的研究报道了参与奖赏效应形成的部分基因，其中最引人注目的是作为转录调节因子的 cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element bindingprotein，CREB）和 CRE－调节基因（cAMP response element modulatorygenes广‘”‘’‘。在酒精成痕万面，过去的大量研究（包括我室自19 9 O至今的研究’“‘－‘”‘）大多集中在酒精引起的神经适应性改变方面，例如研究酒精作用下神经元活动的改变，脑内内源性阿片肽及受体结构和功能的变化，与脑内其它神经递质受体系统关系等，而对酒精成痛的细胞分子机制，尤其是对脑内奖赏通路（伏核、皮层儿REB信号转导功能的改变至今尚不清楚。 成痛物质对内分；必系统的损害越来越受到人们重视。普遍认为内分泌系统功能的紊乱是阿片类药物依赖对机体所造成的最为普遍及严重的损害，而阿片成痕时的戒断症状可能是一种特殊的应激反应，即在阿片耐受与依赖形成过程中，机体逐渐适应这一状态，并逐渐产生了一种对抗这种状态的改变即反适应性的应激能力”“。作为成痫物质之一的酒精同样亦影响到内分泌的每个系统，但有关酒依赖与机体应激关系的研究尚未见报道。 目的：在酒精依赖动物模型上，研究与酒精奖赏效应产生有关6勺中枢结构（伏核、皮层）CREB信号转导通路的改变及戒断后应激行为、应激激素水平的变化，分析伏核／皮层 C R E B表达调控在酒依赖形成中的作用及戒断后机体应激反应与酒躯体依赖形成的关系，以阐明酒依赖形成的部分分子机制，为预防和治疗物质成痫的新药研制提供理论依据。 方法：门）给大鼠饮含低浓度乙醇门％V八）的水溶液 2 8 d； 2 南京医科大学博士学位论文建立酒依赖动物模型，对照组饮自来水。采用开场方法测定大鼠饮酒期间动机活性叉化；参照Erden等＊’‘方法观察大鼠撤除酒精后的戒断综合征；强迫游泳（水温18上I℃）实验检测大鼠撤除酒精后的抑郁症状；以评定酒依赖大鼠模型。（）采用免疫组织化学的方法检坝IJ大鼠伏核／皮层组织内 m蚊n、磷酸化C REB（phosphorylatedCREB，p－CREB）的蛋白表达，Western blot检测包核、包浆内上游激酶Ca卜上调蛋白激酶（CaMKIV）含量，RT干CR法检测伏核／皮层组织内脑源性才经营养因子（brain－derived neurotrophlc factor，BDNF）基因表达，以分析酒 依赖过程中CREB表达调控 勺变化。（3）采用放射免疫分析法检测血浆中ACTH、皮质醇水平，采用冷水强迫游泳（S℃冷水）实验观察饮酒大鼠戒断后的应激反应。 结果：门）大鼠连续饮用低浓度酒精28 d，其动机活动出现一适应性变化过程，即在饮酒第 7、14 d，饮酒大鼠水平动机活动（爬格数）和探究行为（站立次数）均?