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本课题研究了辐照碳纳米管和氧化碳纳米管的制备以及不同环境下,辐照碳纳米管和氧化碳纳米管分别对脯氨酸亚氨基肽酶(PchPipA酶,来源于 Phanerochaetechrysosporium BKM-F-1767)活性的影响。
首先,采用辐照法、氧化法处理原始碳纳米管(化学蒸气沉积法制备),分别得到辐照碳纳米管(IRWNT)和氧化碳纳米管(OXWNT)。FT-IR光谱图显示,在处理过程中,碳纳米管表面被引入羟基、羧基、氨基、羰基等官能团,这些基团的存在改变了碳纳米管在水溶液中的分散性。修饰方法的不同,在碳纳米管表面引入的官能团以及官能团的数量也具有差异,从而可以制备不同水溶性的碳纳米管。采用透射电子显微镜(TEM)以及原子力显微镜(AFM)对制备的碳纳米管进行形貌以及分散性的观察,表征结果显示辐照碳纳米管和氧化碳纳米管具有相同的直径范围(20-40nm),长度为500-1000nm。碳纳米管亲水性检测实验结果表明,辐照碳纳米管和氧化碳纳米管具有不同的水溶性,并且亲水性辐照碳纳米管>氧化碳纳米管。
随后,我们进行了不同碳纳米管在不同环境下对PchPipA酶活性影响的实验研究。将不同浓度的碳纳米管加入到酶反应体系中,发现辐照碳纳米管和氧化碳纳米管均抑制了PchPipA酶活性,随着碳纳米管浓度的升高,抑制作用更为明显,当碳纳米管浓度达到100μg/ml时,辐照碳纳米管和氧化碳纳米管对PchPipA酶活性的抑制率分别为12.2%和42.5%。在不同pH、温度条件下,辐照碳纳米管以及氧化碳纳米管仍表现对PchPipA酶的抑制作用,并且两者对酶活性的抑制作用具有显著性差异。碳纳米管的加入并没有影响PchPipA酶的最适pH和最适反应温度,碳纳米管加入与否,PchPipA酶活性的最适pH均为8.0以及最适反应温度为45℃。