本研究以体外培养的人成骨肉瘤细胞系——U2OS及MG63细胞为对象,利用RNAi技术沉默细胞中人LIMK1基因,观察其对人成骨肉瘤细胞生物学行为的影响及作用机制。通过检测人成骨肉瘤细胞中LIMK1基因及蛋白表达发现,LIMK1在人成骨肉瘤细胞系MG63及U2OS细胞中高表达。本研究成功构建了siRNA真核表达质粒(pSUPER-LIMK1),瞬时转染显示RNA干涉LIMK1基因表达后,明显沉默LIMK1在人成骨肉瘤细胞中的基因及蛋白表达。在insulin促进细胞增殖的实验中,LIMK1信号通路激活,转染pSUPER-LIMK1质粒,使LIMK1基因沉默后,明显减弱insulin促进细胞增殖的作用。1,25(OH)2D3作为肿瘤的分化诱导剂,对人成骨肉瘤细胞主要通过促进骨钙素基因表达,改变细胞形态学、抑制肿瘤细胞增殖、改变肿瘤细胞周期变化发挥重要的作用。流式细胞仪检测LIMK1基因沉默后,人成骨肉瘤细胞停滞在S期,明显抑制了细胞的增殖,说明在1,25(OH)2D3促进人成骨肉瘤细胞分化中,LIMK1信号通路参与其中,发挥重要的调控作用。另外转染pSUPER-LIMK1质粒后,明显抑制了人成骨肉瘤细胞在细胞外基质的迁移和侵袭能力。本研究为以LIMK1为靶点的肿瘤发生机制和肿瘤治疗学研究提供了新的理论基础。