论文部分内容阅读
随着抗生素这一类药物在临床上的广泛应用,细菌出现的耐药性问题日趋严重。细菌耐药性问题的出现和耐药细菌的频繁感染给目前临床抗感染治疗带来极大的技术挑战,严重威胁到全人类健康。迫切需要我们采用一种有效并且不易产生耐药的方法来替代或者直接辅助使用传统的抗生素治疗,光动力抗菌化学疗法有望发展成为解决细菌耐药性的一种新型药物疗法。研究人员发现伤口极易受各种细菌感染,目前临床用于实时诊断伤口细菌是否感染的各种检测工具存在着工作周期长、成本高、操作繁琐等诸多问题,难以完全满足临床实时检测的需求。因此,发展快速高效的细菌检测方法对于各种致病微生物的预防与控制等方面有着重要的现实意义。本论文以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为模型,制备一种新型的智能伤口抗菌敷料,该伤口敷料可以实时感知致病微生物的存在以控制光敏剂的释放,并在伤口发生感染时自动提供比色反应,从而可以实现同步对致病菌的可视化检测和光敏智能抗菌的目的。论文主要研究内容如下:(1)从墨旱莲中提取到具有光敏活性的抗菌剂:2,2’:5’,2’’-三联噻吩-5-甲醛(3T-CHO),用色氨酸改性3T-CHO,被修饰的光敏剂(3TT)最小抑菌浓度达到3.12μg/m L;当光源为氙灯时,3T-CHO与3TT的光动力灭菌效果达到100%;光源为白炽灯和LED白光时,只有3TT具有良好的光动力灭菌效果;当光斑大小为2 cm时,3TT的抑菌率达到100%;单线态氧产率测试中,3TT的单线态氧产率明显优于3T-CHO;用MTT法测试细胞毒性,当3TT的浓度从0.625μM增加到10μM时,成纤维细胞的存活率达到80%以上。(2)将3TT填充到囊泡中,所得囊泡负载在具有检测功能的水凝胶敷料上,制备了具有实时检测和光敏智能抗菌的敷料。当水凝胶和囊泡的比例为5:1时,该敷料具有良好的溶胀性能和降解性能,且对铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的光动力灭菌效果能达到100%;根据致病菌检测结果发现,抗菌敷料能对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌进行可视化检测。(3)以昆明小鼠作为动物模型,将具有检测和治疗作用的敷料用于小鼠创口,观察小鼠创口致病菌的存在情况和创口被光敏剂治疗后的愈合情况,用Elisa法检测创面组织TNF-α,IL-8,MMP-9,MMP-3,IL-2,MMP-8的表达。结果表明,被3TT治疗的小鼠其炎症因子表达偏低,促进伤口愈合的成纤维细胞增多,发生炎症反应的淋巴细胞减少,说明3TT光敏抗菌剂能有效抑制创面细菌生长,促进小鼠皮肤创面快速修复且创口愈合率达到90%以上。