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研究背景复发性外阴阴道假丝酵母菌病(Recurrent Vulvovaginal Candidiasis,RVVC),是指经过治疗后临床症状消失、真菌学检查阴性后再次复发,且在1年内发作4次或以上。局部抗真菌治疗是目前RWC的主要治疗方案,但反复复发一直是疾病治疗的瓶颈。研究显示,阴道微生态环境的变化可能在RWC的发生发展中起重要作用,但目前关于RVVC阴道微生态的研究结果尚未有定论。本研究拟在不同时间点采集RVVC患者及正常对照女性的阴道分泌物,通过Illumina高通量测序技术以及BIPES生物信息分析方法,比较两组间菌群结构及在月经周期中的动态变化以及RWC患者复发前后阴道菌群结构的差异,有望为RVVC复发的机制研究及指导临床治疗提供理论基础。研究目的探究复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者阴道菌群的动态变迁。研究方法1.研究对象:①RVVC组:选取6名于2015年12月～2016年6月在南方医科大学珠江医院妇产科就诊的RWC患者;②对照组:于同期招募5名正常女性作为对照组纳入研究。2.标本采集:详细告知研究对象本实验研究方案及意义并签署知情同意书后,嘱研究对象自行在家至少每隔3天采集一次阴道分泌物,采集时间不少于2个月经周期。采集方法:使用一次性棉签拭子在阴道下1/3处轻轻旋转至少10次,采集完后先置于-20℃冰箱冷冻,后定期将拭子转移至实验室-80℃低温冰箱保存。3.实验方法:分别对每个样本进行细菌总基因组DNA提取、16SrRNAV4区基因扩增及采用Illumina高通量测序技术对扩增的PCR产物进行测序等步骤,再通过BIPES生物信息分析方法,分析比较两组阴道菌群物种丰度和结构以及菌群动态变化。4.统计学处理:应用SPSS20.0软件进行统计学处理,对多样性指数应用Mann-WhitneyU检验。P<0.05认为差异具有统计学意义。研究结果1.正常女性除了以乳酸杆菌属为优势菌属外,加德纳氏菌属、普氏菌属等均可以成为优势菌属,当女性以乳酸杆菌为优势菌属时,其中又以卷曲乳酸杆菌占比居多;而RVVC患者阴道菌群丰富度明显降低,多数RVVC患者是以惰性乳酸杆菌为优势菌属,卷曲乳酸杆菌含量明显减少;2.正常女性阴道菌群可随月经周期的变化出现波动,其中在月经期的波动最为明显,其优势菌属在月经周期中呈现相互交替或保持绝对优势的变化模式;而RVVC患者的阴道菌群相对稳定,波动性减弱,并且在月经期、发作期以及间歇期菌群结构相似。研究结论1.RVVC患者阴道菌群相对稳定,在月经期、发作期以及间歇期菌群结构相似;2.多数RVVC患者是以惰性乳酸杆菌为优势菌属;3.RVVC的治疗应注重阴道微生态环境的调理,诱导卷曲乳酸杆菌产生或抑制惰性乳酸杆菌定植,从而恢复阴道菌群比例,可能可以治愈RVVC。