红三叶为豆科多年生草本植物,含有黄酮、异黄酮、黄酮醇、香豆素和酚羧酸类化合物等,其中异黄酮是其主要成分,药理学研究表明,这些成分具有显著的雌激素样作用,并且具有抗肿瘤、胃溃疡、胃癌、乳腺癌、肠癌和骨质疏松症等作用。本实验研究了红三叶中四种异黄酮大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A以及红三叶总异黄酮的分析方法、红三叶总异黄酮的提取分离纯化工艺。此外,还建立了两种中药片剂灭澳灵片和活络消痛片中紫丁香苷的分析方法。主要实验结果如下：1)采用高效液相色谱法测定红三叶中大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A四种异黄酮的含量。结果表明测定方法的线性、精密度、稳定性、重复性和准确性良好,可为质量标准的制订提供实验依据。2)采用一步水解法作为红三叶的提取工艺,并以大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A四种异黄酮的含量为考察指标,确定了最佳工艺参数：即用含1 M HCl的85%乙醇加热回流提取2次,每次1小时。3)采用D101大孔吸附树脂对红三叶总异黄酮进行分离纯化,具体工艺条件为：上样浓度1.18 mg/mL,上样速度为2 BV／h,依次用4 BV水、2 BV30%乙醇、4 BV70%乙醇洗脱,收集70%乙醇部分。研究结果表明,大孔吸附树脂可用于红三叶总异黄酮的纯化,所制备红三叶总异黄酮的含量达80%以上,而且制备工艺稳定、重复性好,可进行放大生产。4)建立了测定两种中药制剂灭澳灵片和活络消痛片中紫丁香苷含量的高效液相色谱方法。结果表明紫丁香苷在0.16-100μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),最低检出限0.1μg/mL (S/N=3);灭澳灵片的加样回收率为92.2～97.6%,活络消痛片的加样回收率为94.0～102.6%。